Injection intraprostatique de cellules cancéreuses : une technique d’administration de cellules cancéreuses pour établir un modèle murin de cancer de la prostate orthotopique

L’injection tumorale orthotopique intra-prostatique délivre des cellules tumorales correspondant à l’histotype du tissu prostatique directement dans la glande prostatique de l’animal receveur.

Pour commencer, préparez une souris mâle anesthésiée en position couchée. Faites une incision abdominale médiane et disséquez la musculature interne pour exposer la cavité abdominale. Localisez l’un des lobes antérieurs de la prostate. Ces lobes de la prostate sont attachés à la moindre courbure des vésicules séminales et se trouvent près de la vessie.

Maintenant, injectez une suspension réfrigérée de cellules cancéreuses de la prostate mélangées à la matrice de membrane basale souhaitée dans l’axe long du lobe antérieur de la prostate. Assurez-vous que la suspension cellulaire est complète et rétractez doucement l’aiguille. Permettez à la matrice de se solidifier et d’intégrer les cellules à l’intérieur.

Par la suite, replacez le lobe de la prostate avec la vésicule séminale dans la cavité abdominale. Suturer l’incision chirurgicale. Laissez la souris récupérer. Vérifiez la souris chaque semaine pour observer la croissance des tumeurs orthotopiques dans le lobe antérieur de la prostate.

Après avoir confirmé une absence de réponse au pincement des orteils, appliquez une pommade sur les yeux de la souris et rasez toute la fourrure de l’abdomen de l’animal. Stérilisez la peau exposée avec trois cycles de gommage chirurgical à l’aide de tampons stériles non adhérents suivis de lingettes imbibées d’alcool stériles. Lorsque la peau est sèche, placez la souris en position couchée sur une surface propre au-dessus d’un coussin chauffant directement sous l’objectif d’un microscope chirurgical propre, et couvrez l’animal avec un champ stérile avec un petit trou découpé sur l’abdomen.

Faites une incision de 1 centimètre dans la peau externe et la musculature abdominale interne le long de la ligne médiane de l’abdomen au-dessus du pénis et des glandes préputiales. Localisez l’une des vésicules séminales bilatérales et les lobes antérieurs de la prostate qui sont généralement postérieurs, latéraux et légèrement supérieurs à la vessie. Demandez à un assistant de mélanger la solution de cellules cancéreuses matrigel Myc-CaP avec un pipetage doux et d’aspirer lentement 30 microlitres de cellules dans une aiguille de calibre 28 attachée à une seringue de 50 microlitres.

Ensuite, à l’aide d’une pince à tissu Graefe, soulevez doucement l’extrémité d’une vésicule séminale pour créer une tension sur le tissu sans perforer la vésicule, et insérez soigneusement le biseau de l’aiguille parallèlement à l’axe long du lobe antérieur de la prostate. Injectez lentement tout le volume des cellules dans le lobe, puis rétractez lentement l’aiguille pour éviter les fuites.

Une injection réussie se manifestera par un engorgement du lobe interne de la prostate. Prudemment et régulièrement, maintenez la vésicule séminale et le lobe de la prostate injecté à l’extérieur de la souris pendant environ 30 secondes pour permettre au matrigel de se solidifier partiellement à l’intérieur du lobe. Utilisez un applicateur stérile à embout en polyester pour recueillir toute fuite de solution cellulaire dans l’abdomen afin d’empêcher le développement de tumeurs non orthotopiques.

Une injection intra-prostatique précise est essentielle pour le développement d’une tumeur orthotopique. Prendre des précautions supplémentaires pour éviter de percer la vésicule séminale, pour injecter lentement la suspension de cellules cancéreuses et pour recueillir toute fuite cellulaire augmentera le succès de cette procédure.

Maintenant, ramenez doucement la vésicule séminale et le lobe injecté dans l’abdomen sans exercer de pression sur le lobe et remplacez tous les tissus extériorisés. À l’aide de sutures à l’aiguille de coupe inversée résorbables 5-0 en vicryl, fermez la musculature abdominale interne avec des points de suture continus, puis fermez la peau abdominale externe avec des points interrompus à l’aide de sutures à l’aiguille de coupe inversée non résorbables en monofilament de nylon 4-0.

Ensuite, administrez une analgésie postopératoire et placez la souris dans une cage sans litière à mi-chemin sur un coussin chauffant avec surveillance jusqu’à ce qu’elle se rétablisse complètement.

• Prostate Cancer Model - A lab representation to study the progression & treatment of prostate cancer.
• Intraprostatic Injection - Technique of injecting medication or solution directly into the prostate.
• Matrigel - A gelatinous protein matrix used in tumor cell research.
• Orthotopic Tumor Model - Study model wherein tumor cells are implanted in their original organ.
• Seminal Vesicles - Male reproductive glands located near the prostate, integral to the injection procedure.

• Introduce Prostate Cancer Model – Biological method to examine prostate cancer (e.g., intraprostatic injection).
• Key Concepts – Involve steps like shaving, sterilizing, incising and suturing (e.g., prostate biopsy procedure video).
• Underlying Mechanisms – Seminal vesicles and anterior prostate lobes are involved (e.g., prostate cancer real images).
• Connect to Experiment – Demonstrate how injections ensure successful tumor implantation within prostate.

• What is intraprostatic injection used for in a prostate cancer model?
• How is the matrigel cancer cell solution involved in the procedure?
• Why is careful handling of seminal vesicles and prostate lobes crucial in this experiment?

• Practical Applications – Used in surgical training and cancer treatment research (e.g., prostate cancer injection).
• Industry Impact – Benefits medical industries, particularly oncology and urology (e.g., injection for prostate cancer).
• Societal Importance – Advancement in prostate cancer treatment techniques (e.g., injection prostate).
• Link to Scientific Advancements – Continuous improvement of prostate cancer models for research.