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Recherche sur le cancer
0 vues • 4:50 min • April 30th, 2023
La phosphorylation de résidus d’acides aminés spécifiques, comme la tyrosine, génère des phosphopeptides qui jouent un rôle essentiel dans la régulation de plusieurs voies de signalisation cellulaire. Leur étude permet d’identifier des biomarqueurs potentiels pour le traitement du cancer.
Pour isoler les phosphopeptides, commencez par une poudre lyophilisée de digestats peptidiques purifiés extraits de tissus cancéreux. Remettre la poudre en suspension dans un tampon approprié pour préparer une suspension peptidique uniforme. Maintenez un pH neutre pour assurer la stabilité des peptides.
Préparez une suspension composée de billes d’hydrogel conjuguées à des anticorps anti-phosphopeptides spécifiques dans le tampon souhaité. Ajoutez la boue de billes à la suspension peptidique. Les anticorps immobilisés sur les billes reconnaissent et se lient à leurs résidus d’acides aminés phosphorylés spécifiques dans les phosphopeptides, formant des complexes.
Centrifuger le mélange pour recueillir les complexes phosphopeptide-billes dans la pastille. Retirez le surnageant contenant des peptides non liés ou des phosphopeptides non spécifiques. Ajoutez un tampon d’élution à faible pH approprié au
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