La cryoconservation par vitrification : une technique de refroidissement ultra-rapide pour conserver les spécimens biologiques à très basse température en vue d’un stockage à long terme
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0 vues • 4:24 min • April 30th, 2023
La vitrification, technique de cryoconservation ultra-rapide, permet de refroidir et de stocker des cellules et des tissus vivants à des températures extrêmement basses pendant de très longues durées.
Pour vitrifier un tissu tumoral fraîchement récolté, prenez d’abord le tissu sur une plaque de culture. Excisez toutes les régions nécrotiques, les régions contenant de la graisse ou les caillots sanguins de la tumeur. Lavez le mouchoir pour éliminer toute trace de sang.
Coupez le tissu en tranches d’épaisseur appropriée. Maintenant, transférez les tranches dans un tube contenant une solution de vitrification constituant du DMSO, ou diméthylsulfoxyde, et du saccharose. Ces constituants agissent comme des cryoprotecteurs pour protéger les cellules contre les dommages causés par la congélation.
Incuber à basse température. Le DMSO, un cryoprotecteur qui pénètre dans les cellules, se diffuse à travers la membrane cellulaire et remplace l’eau dans les cellules pour empêcher la formation de cristaux de glace intracellulaires. Parallèlement, le saccharose, un cryoprotecteur non perméant, agit de manière extracellulaire en facilitant la déshydratation cellulaire et en réduisant la formation
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