JoVE Encyclopedia of Experiments
Recherche sur le cancer
0 vues • 3:40 min • April 30th, 2023
Pour commencer, préparez une souris euthanasiée en position couchée. Serrez l’un de ses pieds pour étendre le membre verticalement. Tenez doucement la peau du membre inférieur.
Ensuite, enlevez chirurgicalement la peau et le fascia, la couche de tissu conjonctif lâche juste sous la peau, exposant les ventres musculaires sous-jacents du membre inférieur.
Identifiez le muscle gastrocnémien - un gros muscle superficiel à deux têtes - sur le membre inférieur postérieur. Il prend naissance dans les condyles latéraux et médiaux du fémur postérieur et s’attache au calcanéum - l’os du talon - via le tendon calcanéen.
Tenez l’extrémité distale du muscle et tirez le ventre musculaire vers son origine. Excise le tendon calcanéen gastrocnémien puis le muscle à l’origine le plus proche du fémur.
Maintenant, localisez le muscle tibial antérieur. Le muscle prend naissance à partir de la surface antérolatérale du tibia et s’attache à l’os cunéiforme médial via le tendon distal.
Détachez le muscle tibial du ventre du tissu conjonctif sous-jacent. Coupez le tendon distal et le muscle à l’origine la plus proche du tibia.
Enfin, transférez les muscles excisés dans des cryotubes. Stockez les tubes à basse température jusqu’à une analyse ultérieure en aval.
Pour éviter la contamination de la fourrure, vaporisez de l’éthanol à 70 % sur l’ensemble du corps. Ensuite, placez l’animal sur un lit de dissection en position couchée et fixez un membre postérieur à une pince à burette surélevée pour étendre le membre verticalement. À l’aide d’une pince de Dumont, saisissez la peau superficielle du membre postérieur et utilisez des ciseaux fins incurvés pour retirer doucement la peau et le fascia, exposant ainsi les muscles ventraux sous-jacents du membre inférieur.
Identifier le muscle gastrocnémien sur le membre inférieur postérieur par son origine au niveau des condyles latéraux et médiaux du fémur postérieur et son insertion au niveau du calcanéum via le tendon calcanéen. Utilisez la pince pour saisir l’extrémité distale du gastrocnémien et tirez le ventre musculaire vers son origine. Ensuite, à l’aide de ciseaux, coupez le muscle à l’origine au plus près du fémur et transférez le muscle dans un plat pré-pesé.
Pesez immédiatement le plat et transférez le muscle dans un cryotube pré-étiqueté. Ensuite, identifiez le muscle tibial antérieur depuis son origine à la surface antérolatérale du tibia et son insertion dans le cunéiforme médial via son tendon distal. Ensuite, saisissez le pied par les doigts avec l’index et le pouce et insérez la pointe de la pince de Dumont immédiatement sous le tendon distal superficiel du tibial.
Déplacez la pince de manière à ce que le côté émoussé puisse être utilisé pour détacher le muscle tibial du tissu conjonctif sous-jacent et utilisez les ciseaux fins et incurvés pour couper le tendon distal. Ensuite, coupez le muscle à l’origine au plus près du tibia.