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Chez les rongeurs, le rein a une enveloppe extérieure fibreuse protectrice appelée capsule rénale et une couche de graisse périnéphrique au-dessus. Pour extraire le rein murin sans les couches environnantes, commencez par positionner une souris euthanasiée en position couchée sur un lit chirurgical.
Inciser la peau abdominale et les couches musculaires. Continuez à faire des incisions longitudinales jusqu’à ce que la cavité abdominale soit exposée. Ensuite, localisez les intestins et soulevez-les légèrement. Coupez sous les intestins et retirez-les du corps de la souris pour exposer les reins.
Ensuite, trouvez l’uretère et coupez les tissus conjonctifs sous-jacents afin que les reins se séparent de la cavité abdominale. Exciser les deux reins individuellement. Placez le rein extrait dans une boîte contenant un tampon glacé et observez-le au microscope à dissection.
Maintenant, retirez la graisse périnéphrique du rein pour visualiser le bassinet du rein, une partie dilatée de l’uretère en forme d’entonnoir. Coupez une partie du bassinet du rein de la base pour enlever les restes de l’uretère.
Enfin, percez superficiellement la capsule rénale fibreuse externe. À l’aide de l’ouverture créée, pelez soigneusement toute la capsule rénale de la surface du rein. Cela permet d’enlever la glande surrénale - une glande endocrine attachée à la capsule rénale - et d’obtenir un rein intact.
À l’aide d’une pince à tissus internes et de ciseaux de dissection interne, pincez les intestins et retirez-les de la paroi abdominale. Simultanément, coupez la face inférieure des intestins libres du corps au niveau du duodénum proximal et du côlon distal pour accéder à l’espace rétropéritonéal contenant les reins.
Pincez doucement et soulevez l’extrémité distale de l’uretère à l’aide d’une pince à tissus. À l’aide des ciseaux de dissection, coupez sous l’uretère pincé vers le rein jusqu’à ce qu’il se soit libéré du tissu conjonctif environnant. Une fois les reins exposés, extrayez-les individuellement.
Remplissez un plat recouvert d’élastomère de silicone avec une solution KRB glacée. Transférez le rein dans la boîte de dissection et assurez-vous qu’il est complètement immergé. Utilisez des ciseaux à ressort fins et une pince interne pour retirer le tissu adipeux de la base du rein afin d’exposer le bassinet rénal distal ou RP et l’uretère proximal.
Retirez l’uretère proximal et une partie du RP distal de la base à l’aide de ciseaux à ressort fins et d’une pince. Percez la capsule rénale externe à l’aide d’une pince à pointe fine, en inclinant les pointes loin du corps rénal. À l’aide d’une pince avec chaque main, pincez les extrémités libres de la capsule et séparez-les jusqu’à ce que la membrane restante de la capsule rénale soit entièrement retirée.
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