Isolement des cellules musculaires lisses du détrusor : une procédure de digestion enzymatique pour obtenir des cellules DSM à partir d’échantillons de vessie urinaire humaine

Les cellules du muscle lisse détrusor, ou DSM, présentes dans la paroi de la vessie constituent l’unité fonctionnelle primaire de la vessie. Ces cellules se détendent pour faciliter le stockage de l’urine dans la vessie et se contractent pour libérer l’urine.

Pour isoler les cellules du DSM, commencez par prélever un échantillon de vessie urinaire humaine prélevé. Lavez l’échantillon pour éliminer toute trace de sang et de débris. Par la suite, fixez le tissu avec sa surface muqueuse vers le haut. Excise la graisse, les vaisseaux sanguins et la couche muqueuse pour exposer la couche musculaire détrusor sous-jacente. Ensuite, coupez le tissu sans muqueuse en petits fragments.

Traitez les fragments de tissu avec un cocktail de digestion contenant de la papaïne et incubez. La papaïne, une enzyme protéolytique, favorise la digestion des protéines de la matrice extracellulaire qui maintiennent les cellules ensemble et initie le relâchement des cellules de la matrice. Maintenant, retirez le surnageant contenant de la papaïne.

Ajouter une suspension d’enzymes de collagénase aux fragments de tissu et incuber à température physiologique. La collagénase décompose la matrice extracellulaire e