Isolement des glomérules : une technique pour obtenir des glomérules intacts à partir d’un rein murin

Dans les reins des vertébrés, les néphrons sont constitués de multiples glomérules - un réseau dense de vaisseaux sanguins - qui jouent un rôle primordial dans la filtration des déchets du corps.

Pour isoler les glomérules, commencez par prélever un rein de souris fraîchement disséqué. À l’aide d’une pince, décollez la capsule rénale du rein et placez le rein propre dans une nouvelle boîte de culture. Maintenant, placez le plat sur de la glace pour éviter la dégradation des reins. Coupez le rein en petits morceaux.

Ensuite, mettez en suspension les morceaux de rognons hachés dans une solution tampon appropriée. Filtrez la suspension tissulaire à travers un filtre à mailles de grande taille et recueillez le flux dans une boîte fraîche. Répétez cette étape quelques fois de plus tout en diminuant progressivement la taille des mailles à chaque fois, jusqu’à ce que les glomérules se dissocient des fragments de rein.

Enfin, lavez le filtre avec le milieu de culture souhaité pour recueillir les plus petits glomérules piégés tandis que les fragments de rein restent dans le filtrat. Transférez les glomérules sur une plaque de fixation ultra-basse. Visualisez la plaque à l’aide d’un microsco