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0 vues • 2:42 min • April 30th, 2023
Les sphéroïdes cancéreux sont des agrégats cellulaires tridimensionnels de cellules tumorales. Ces sphéroïdes peuvent être intégrés dans la matrice de collagène, ce qui entraîne la formation de blocs sphéroïdes. Pour congeler instantanément un bloc sphéroïde, commencez par placer un bloc sphéroïde en gel de collagène au centre d’un moule histologique.
Rincez le bloc avec un tampon approprié et complétez le moule avec une solution fixatrice. Incuber pour permettre à cette solution de pénétrer dans les sphéroïdes et de réticuler les protéines cellulaires. Cette étape permet de maintenir la structure sphéroïde pour la procédure ultérieure. Ensuite, aspirez la solution fixatrice.
Placez le bloc de gel sphéroïde dans un moule d’histologie frais contenant une fine couche de milieu d’enrobage. Superposez-le avec plus de support d’enrobage pour immerger complètement le bloc sphéroïde. Enfin, plongez le moule dans un bain d’azote liquide pendant une courte durée.
La congélation rapide empêche la formation de cristaux de glace plus gros dans les sphéroïdes. Il aide à conserver l’intégrité des sphéroïdes sans causer de dommages mécaniques. Une fois que la couche de support d’enrobage se solid
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