Génération d’un modèle murin d’infarctus du myocarde : une procédure chirurgicale pour la ligature permanente de l’artère coronaire descendante antérieure gauche dans un modèle murin

Pour commencer, préparez une souris anesthésiée en position couchée. Faites une incision longitudinale dans son cou et déplacez les glandes salivaires. Ensuite, séparez le fascia - une couche de tissu conjonctif entourant les muscles de la sangle - pour révéler la trachée sous-jacente.

Par la bouche, insérez une canule d’intubation et confirmez l’insertion trachéale précise via l’incision. Connectez la canule au ventilateur réglé aux paramètres souhaités, ce qui fournit une ventilation adéquate à la souris.

Maintenant, positionnez la souris en position de décubitus latéral droit. Incisez la peau entre les muscles pectoraux gauches et séparez le fascia. Réglez le ventilateur sur la pression expiratoire positive ou le réglage PEP.

Effectuez une thoracotomie du côté gauche dans le troisième espace intercostal - une incision pratiquée entre la troisième et la quatrième côte. La pression positive dans les voies respiratoires pendant le mode PEP évite le collapsus alvéolaire pendant la thoracotomie.

Après avoir accédé au cœur, retirez le péricarde. Identifiez l’artère coronaire descendante antérieure gauche ou LAD - un vaisseau rouge vif qui se ramifie à partir de l’artère coronaire gauche. L’artère LAD fournit du sang à la majeure partie du ventricule gauche.

Ligaturer chirurgicalement l’artère LAD proximale aux oreillettes gauches. Cette ligature de l’artère LAD provoque une pâleur du ventricule. Fermez l’incision. Remettez l’animal dans sa cage. La ligature permanente de l’artère LAD obstrue le flux sanguin et l’apport d’oxygène aux muscles cardiaques, entraînant leurs dommages et leur mort.

Utilisez un rasoir électrique pour raser rapidement une souris mâle C57BL/6 anesthésiée de 25 à 30 grammes sur la gorge et le côté gauche de la cage thoracique. Confirmez une absence de réponse au pincement des orteils. Appliquez de la pommade sur les yeux de l’animal. Placez la souris en position couchée sur un coussin chauffant et placez une petite compresse de gaze sous la tête pour éviter de surchauffer les yeux.

Fixez les membres avec du ruban adhésif. Passez une boucle de suture en soie 5-0 sous les incisives supérieures et fixez l’extrémité de la boucle sur le coussin chauffant pour garder la bouche ouverte pendant la canulation. Appliquez une crème dépilatoire sur les zones pré-rasées et massez doucement avec un coton-tige pendant 1 minute.

Retirez l’excès de fourrure et de crème avec de la gaze et nettoyez la peau exposée avec des gouttes de solution saline à 0,9 % et de la gaze. Appliquez des morceaux de gaze stérile sur la gorge et le thorax rasés et trempez la gaze avec de l’iodopovidone. Réglez le ventilateur à un volume courant de 7 millilitres par kilogramme et à un taux de ventilation de 140 coups par minute.

Passez la souris sous un stéréomicroscope de microchirurgie. En tenant la peau au centre de la gorge, faites une incision de 0,5 centimètre le long de la ligne caudale / céphalique et séparez les lobes de la glande salivaire. À l’aide d’une pince incurvée, séparez doucement le fascia du muscle sterno-hyoïdien jusqu’à ce que le larynx et la trachée soient visibles. Ensuite, fixez les bords de l’ouverture avec des écarteurs attachés à des élastiques.

Ensuite, tirez doucement la langue sur le côté et utilisez une pince pour insérer l’aiguille interne émoussée d’une canule de calibre 16 dans la trachée. Visualisez une insertion correcte dans la trachée par l’incision de la gorge et connectez la canule au ventilateur. Placez une solution saline stérile à 0,9 % complétée par de la gaze imbibée d’iodopovidone sur l’incision pour garder les tissus humides pendant l’opération.

Ensuite, placez le tube d’évacuation dans l’eau. La présence de bulles indique une intubation réussie. Pour la ligature de l’artère coronaire descendante antérieure gauche ou LAD, déplacez soigneusement la souris dans la position de décubitus du côté droit et fixez à nouveau le membre antérieur gauche dans la nouvelle position.

Identifiez la ligne entre les muscles pectoraux petits et majeurs gauches et faites une incision cutanée oblique de 1 centimètre le long de la ligne. À l’aide de micro-ciseaux de dissection émoussés, séparez le fascia des muscles pectoraux sans inciser les tissus et utilisez des écarteurs attachés à des élastiques pour maintenir la séparation.

Réglez le ventilateur avec une pression expiratoire positive de 3 centimètres d’eau. Utilisez une pince émoussée pour ouvrir la cavité thoracique au troisième espace intercostal entre la troisième et la quatrième côte. Placez deux écarteurs dans la cage thoracique, un sur chaque côte, et utilisez une pince fine incurvée pour retirer soigneusement le péricarde sans endommager le cœur et les poumons.

Localisez le DAL comme une ligne superficielle rouge vif allant du bord de l’oreillette gauche vers l’apex. À l’aide d’un porte-aiguille, passez une suture en soie 7-0 sous le DAL, à 2 à 3 millimètres sous les oreillettes gauches. En tirant lentement sur la soie pour éviter de déchirer le tissu cardiaque, attachez la ligature avec trois nœuds. La partie inférieure gauche du ventricule gauche deviendra instantanément pâle lors de la ligature.

Maintenant, relâchez les écarteurs de côtes et, en tenant la troisième côte avec une pince, faites deux passages avec la suture en soie 6-0 sous les troisième et quatrième côtes. Placez trois gouttes de solution saline à 37 degrés Celsius, 0,9 % sur l’ouverture et fermez le tube d’échappement périmé pendant 2 ou 3 cycles respiratoires pour gonfler correctement les poumons.

Serrez et fixez la suture avec deux lancers, et relâchez les écarteurs qui maintiennent les muscles, aidant les muscles à revenir à leur emplacement anatomique correct. Ensuite, fermez la peau thoracique avec deux points de suture et deux jetés de soie de suture 5-0. Fermez la peau de la gorge avec un point de suture 5-0 en soie et deux jetés.