Injection de microbulles dans des embryons de souris isolés : une technique pour délivrer des agents de contraste à microbulles dans le système vasculaire d’embryons murins vivants

Pour l’administration de microbulles, commencez par une suspension uniforme de microbulles à enveloppe lipidique ciblées par des cellules endothéliales comprenant un noyau gazeux dans une seringue reliée à la tubulure.

Chargez cet ensemble dans un pousse-seringue et fixez une aiguille en verre à la tubulure. Maintenant, transférez un embryon de souris réfrigéré exprimant des récepteurs spécifiques des cellules endothéliales dans une boîte placée sur la scène d’un stéréoscope.

Extériorisez doucement l’embryon du sac vitellin et de la membrane amniotique. Fixez le sac et les bords placentaires. Rincez l’embryon avec un tampon chaud pour rétablir sa circulation sanguine. Couvrez l’embryon avec du gel à ultrasons préchauffé pour une transmission optimale des ondes ultrasonores. Compléter avec un tampon pour maintenir ses conditions physiologiques.

Injectez soigneusement la suspension de microbulles au débit souhaité dans une veine appropriée à la surface de la membrane fœtale du disque placentaire à l’aide de la pompe à seringue. Les microbulles injectées voyagent dans la circulation et se lient aux récepteurs spécifiques des cellules endothéliales qui tapissent les vaisseaux sanguins.