Isolement des bactéries commensales conjonctivales à base d’écouvillons : une technique pour isoler les bactéries commensales de la conjonctive d’un modèle murin

La conjonctive de l’œil abrite des bactéries commensales. Cette microflore indigène protège l’œil contre les infections en activant les cellules immunitaires pour attaquer tous les microbes nocifs qui pénètrent dans les muqueuses oculaires.

Pour isoler les bactéries commensales, placez une souris anesthésiée en position latérale. Prélever un écouvillon oculaire stérile trempé dans un milieu approprié. Insérez l’embout humide dans la région conjonctivale médiale de l’œil gauche. Abaissez le globe oculaire et déplacez l’écouvillon d’avant en arrière le long de la conjonctive pour recueillir une population commensale diversifiée.

Retirez l’écouvillon et mélangez-le dans un tube contenant un média d’enrichissement microbien. Cette étape libère les bactéries piégées du maillage de coton de l’écouvillon dans le média. Jetez l’écouvillon et incubez le tube pour faciliter le début de la croissance bactérienne.

Versez quelques gouttes de l’écouvillon oculaire inoculé dans un milieu enrichi sur une plaque de gélose au sang selon le schéma souhaité et incuberez. Les peptones de caséine et de soja présents dans le milieu fournissent l’azote nécessaire à la synthèse des peptides tandis que le c