0 vues • 2:52 min • July 8th, 2025
Les embryons de souris sont utilisés comme systèmes modèles pour l’étude de l’embryogenèse précoce des mammifères. Pour récupérer des embryons de souris périnatales au stade souhaité du développement embryonnaire, commencez par une souris enceinte euthanasiée en position couchée.
Ensuite, stérilisez sa région abdominale et faites une incision transversale sur la paroi abdominale pour révéler les cornes utérines sous-jacentes. Les cornes utérines sont de longues structures tubulaires contenant une chaîne d’embryons. Maintenant, séparez soigneusement les cornes utérines de l’abdomen en les excisant des tissus environnants.
Transférez les cornes utérines récoltées dans un plat contenant un tampon. Rincez les cornes utérines pour éliminer les débris tissulaires et le sang. De plus, incisez entre les sites d’implantation le long des cornes utérines pour séparer chaque embryon. Exciser la décidule, la couche placentaire maternelle, ainsi que le disque placentaire dérivé de l’embryon.
Ensuite, retirez la petite structure membraneuse extra-embryonnaire entourant l’embryon qui le nourrit - le sac vitellin. Enfin, retirez la membrane amniotique - la membrane extraembryonnaire la plus interne constituée d’un sac rempli de liquide qui entoure et protège l’embryon - pour libérer l’embryon de souris.
Les embryons périnataux récupérés peuvent être utilisés pour étudier le développement précoce des mammifères.
Nettoyez les ciseaux et les pinces de dissection avec de l’éthanol à 70 %. Pour prélever des embryons périnataux à E18.5 ou E19.5, il faut d’abord euthanasier des souris enceintes en utilisant l’inhalation de dioxyde de carbone. Ensuite, effectuez une luxation cervicale selon les directives du NIH.
Ensuite, vaporisez de l’éthanol à 70 % sur la surface abdominale ventrale de l’animal. Ensuite, à l’aide des ciseaux de dissection stériles et de la pince, ouvrez éventuellement la cavité abdominale. Soulevez tout l’utérus et séparez-le du corps au bout des cornes utérines. Ensuite, rincez tout l’utérus avec 1x PBS dans une boîte de Pétri.
Coupez l’utérus segmentairement avec des ciseaux de dissection et retirez la décidue placentaire avec une pince à dissection pour exposer les embryons dans les sacs vitellins. Retirez d’abord le sac vitellin, puis retirez la membrane amniotique à l’aide d’une pince à dissection pour libérer les embryons périnataux.