Isolement du nœud sino-auriculaire à partir d’un modèle murin : une procédure pour récolter le nœud SA du cœur murin

Dans le cœur, le nœud sino-auriculaire ou nœud S-A contient des cellules musculaires spécialisées qui initient et propagent continuellement des impulsions électriques dans tout le cœur, fixant la fréquence du rythme cardiaque.

Pour isoler le ganglion S-A, préparez d’abord une souris euthanasiée traitée par un anticoagulant en position couchée. Le traitement anticoagulant aide à prévenir la formation de caillots sanguins pour une isolation efficace des tissus.

Ensuite, faites une incision cutanée transversale suivie d’une coupe des parois latérales de la cage thoracique pour accéder au contenu de la cavité thoracique et exposer le cœur sous-jacent.

Hydratez le cœur avec un tampon contenant un anticoagulant. Retirez les poumons ainsi que la trachée.

Sectionnez les principaux vaisseaux sanguins pour exciser le cœur de la cavité thoracique. Transférez le cœur excisé dans un récipient contenant un tampon doublé de silicone-élastomère pour la manipulation de l’organe délicat.

Fixez l’apex du cœur. Maintenant, localisez la position de la veine cave inférieure et supérieure dans l’oreillette droite. De plus, identifiez l’emplacement du nœud S-A dans la tache tissulaire entre les veines caves.

Retirez l’apex pour drainer le sang du cœur. Maintenant, séparez les oreillettes des ventricules. Coupez le long du septum interauriculaire pour enlever l’oreillette gauche. Posez l’oreillette droite à plat et excisez-en le tissu du ganglion S-A.

Commencez par tenir la peau de la souris euthanasiée avec un hémostat et utilisez des ciseaux chirurgicaux pour faire une incision transversale dans la peau, juste sous le bas de la cage thoracique, de l’arc costal gauche à l’arc costal droit. Utilisez des ciseaux chirurgicaux pour ouvrir le péritoine et séparez soigneusement le foie du diaphragme. sans entailler le foie, pour éviter des saignements excessifs.

Inciser le diaphragme le long du thorax pour exposer la cavité thoracique. Utilisez les ciseaux chirurgicaux pour couper les parois latérales de la cage thoracique, des bords des arcs costaux jusqu’aux clavicules, afin d’exposer le cœur. Ensuite, utilisez une aiguille de seringue de calibre 23 pour épingler la cage thoracique sur l’épaule.

À l’aide d’une pipette de transfert, déposez la solution Complete Tyrode héparinée chaude sur le cœur pour le maintenir humide. Tenez les poumons avec une pince Graefe extra fine et sectionnez la trachée avec des ciseaux chirurgicaux pour retirer les poumons. Pour enlever le cœur, tenez l’apex du cœur avec une pince Graefe extra fine et coupez l’aorte et la veine cave inférieure avec des ciseaux chirurgicaux.

Transférez le cœur dans une boîte de Pétri contenant un élastomère de silicone durci et utilisez une pipette de transfert pour baigner le cœur avec 2 à 3 millilitres de solution héparinée chaude Complete Tyrode. Fixez l’apex du cœur au plat à l’aide d’une goupille de dissection.

Tenez la veine cave inférieure à l’aide d’une pince à laminectomie Dumont #2. Insérez une aiguille de seringue de calibre 22 dans la veine cave inférieure et supérieure pour localiser leur position dans l’oreillette droite, ce qui identifie également la position approximative du nœud sino-auriculaire.

Tenez l’appendice auriculaire droit à l’aide d’une pince à laminectomie Dumont #2 et placez une goupille de dissection dans l’appendice auriculaire droit pour le maintenir en place. Répétez la même procédure pour l’appendice auriculaire gauche. Ensuite, retirez l’aiguille de la seringue qui enjambe la veine cave.

Utilisez des ciseaux Castroviejo pour enlever l’apex du cœur en faisant une incision transversale à travers les ventricules ou en libérant le sang du cœur. Ensuite, lavez le cœur en ajoutant de la solution Complete Tyrode héparinée chaude. Utilisez des ciseaux Castroviejo pour couper le long du septum auriculo-ventriculaire jusqu’à ce que les oreillettes soient séparées des ventricules, et gardez l’incision plus près du ventricule.

Coupez le long du septum interauriculaire pour enlever l’oreillette gauche. Placez les broches de dissection à la périphérie de l’oreillette droite pour qu’elles soient à plat. Retirez la graisse, les vaisseaux ou les tissus restants de l’oreillette à l’aide des ciseaux Castroviejo et localisez le nœud sino-auriculaire dans l’oreillette droite.