Imagerie intravitale : méthode d’observation cellulaire du pancréas de souris à travers une fenêtre d’imagerie stabilisée

L’imagerie intravitale consiste à visualiser les cellules d’un animal vivant à travers une fenêtre d’imagerie implantée dans l’animal. Il permet d’observer à long terme la dynamique cellulaire sans compromettre leurs fonctions.

Pour commencer, prenez une souris transgénique anesthésiée préalablement implantée avec une fenêtre d’imagerie pancréatique soutenue par une plaque métallique. La plaque de base sépare spatialement le pancréas de l’intestin, réduisant ainsi les artefacts de mouvement des mouvements physiologiques tels que le péristaltisme.

La souris transgénique exprime la protéine fluorescente verte ou GFP sous le promoteur du gène de l’insuline exprimé dans les cellules bêta des îlots pancréatiques.

Ensuite, tenez fermement la queue de la souris et vaporisez un désinfectant pour éliminer tous les contaminants de surface. Insérez un cathéter dans la veine latérale de la queue. Injectez une solution contenant des anticorps marqués à l’aide d’une sonde fluorescente rouge dans la veine de la queue. Ces anticorps se lient aux cellules qui tapissent les vaisseaux sanguins, les colorant en rouge.

Maintenant, passez la souris à une configuration de microscopie intravitale. Insérez