JoVE Encyclopedia of Experiments
Biologie
0 vues • 3:58 min • July 8th, 2025
La résection apicale d’une souris néonatale est une procédure qui consiste à enlever l’apex ventriculaire gauche du cœur. La lésion qui en résulte active les macrophages cardiaques néonatals qui favorisent les processus cellulaires de réparation cardiaque. Cependant, cette capacité de régénération devient limitée à l’âge adulte, entraînant une insuffisance cardiaque. La transplantation de macrophages cardiaques néonatals dans le cœur adulte peut restaurer la fonction cardiaque.
Pour commencer, placez une souris néonatale sur de la glace pour induire une hypothermie qui engourdit la souris. Transférez et préparez la souris inconsciente sur une plate-forme chirurgicale. Maintenant, sous un stéréoscope, incisez horizontalement le côté gauche de la poitrine et séparez les muscles sous-jacents pour visualiser le cœur.
Appliquez une pression sur la poitrine et l’abdomen pour extérioriser le cœur. Coupez soigneusement le tissu de l’apex ventriculaire jusqu’à ce que le saignement expose la chambre ventriculaire gauche. À l’aide d’un coton-tige, appuyez sur le cœur dans la cavité thoracique. Suturez la paroi thoracique incisée. Appliquez de la colle tissulaire pour joindre la peau. Par la suite, transférez la souris sur une couverture chauffante pour arrêter l’hypothermie. Ensuite, déplacez la souris néonatale opérée dans la cage de sa mère pour un rétablissement rapide.
Après la résection apicale, les macrophages cardiaques résidents s’accumulent dans le site blessé. Par la suite, ces macrophages peuvent être isolés pour être transplantés dans le cœur adulte.
Commencez par pré-refroidir la plate-forme d’exploitation en bronze pendant la nuit à moins 20 degrés Celsius. Sortez la souris anesthésiée de la glacière et placez-la sur la plate-forme. Ancrez la souris en position couchée à l’aide de ruban adhésif médical. Placez la plate-forme d’exploitation avec la souris sous un stéréoscope et désinfectez le coffre de la souris à l’aide d’un tampon de préparation imbibé de bétadine et d’alcool à 70 %.
Incisez la peau avec une incision de 1 centimètre au niveau de la quatrième zone intercostale de la cavité thoracique et séparez les muscles intercostaux à l’aide de ciseaux microchirurgicaux jusqu’à ce que le cœur soit accessible. Appuyez alternativement sur la poitrine et l’abdomen à l’aide de deux pinces jusqu’à ce que le cœur soit extériorisé hors de la poitrine, sans aucun dommage mécanique.
Placez les côtes en dessous et au-dessus de la petite incision comme fixation naturelle pour immobiliser le cœur. Localisez l’apex du ventricule gauche et coupez un diamètre de 1 millimètre de tissu de l’apex ventriculaire à l’aide de ciseaux d’iridectomie. Confirmez que la chambre ventriculaire gauche est exposée et commence à suinter.
Appuyez doucement sur le cœur dans la cavité thoracique à l’aide d’un coton-tige. Suturez les muscles, les côtes et la peau à l’aide de 8-0 proline sutures, et nettoyez soigneusement la souris après l’opération. Transférez la souris de la plate-forme d’utilisation à une couverture chauffante à 37 degrés pour réchauffer le corps immédiatement après l’opération.
Confirmez l’anabiose de la souris en observant les signes de restauration de la respiration spontanée, le changement de couleur de la peau du pâle au rose et le mouvement des membres. Ramenez la souris opérée à sa mère, une fois qu’elle a récupéré. Mélangez la souris opérée et les matériaux de nidification de sa mère si nécessaire.