Modèle de lymphœdème de la queue murine : une technique in vivo pour générer un lymphœdème soutenu dans la queue murine

0 vues3:21 min • July 8th, 2025

Les vaisseaux lymphatiques sont présents dans le derme de la peau et leur fonction est d’éliminer l’excès de liquide interstitiel des tissus. Les lésions des vaisseaux lymphatiques entraînent une accumulation excessive de liquide dans l’espace interstitiel et une augmentation du dépôt sous-cutané de tissu fibreux et adipeux. Ces changements entraînent un lymphœdème.

Pour générer un lymphœdème dans la queue murine, prenez une souris anesthésiée et placez-la en position couchée. Faites une excision cutanée circonférentielle de pleine épaisseur à un endroit suffisamment éloigné, distal à la base de la queue. Inciser un autre site sur la queue inférieur à la première coupe.

Faites une incision cutanée verticale reliant les deux incisions préfabriquées. À l’aide de cette coupe, excisez le patch cutané superposé pour exposer les veines latérales et les vaisseaux lymphatiques.

Prenez une seringue contenant un colorant coloré et injectez-la par voie sous-cutanée près de l’extrémité de la queue, ce qui fait apparaître les vaisseaux lymphatiques bleus. Transectez les vaisseaux lymphatiques, enveloppez le site de la plaie et surveillez la souris pendant la durée souhaitée.

La microdissection arrête le flux de lymphe dans les vaisseaux et le liquide s’accumule dans l’espace tissulaire. Par conséquent, un lymphœdème soutenu est observé sous forme de gonflement de la queue de souris dorsale par rapport au site chirurgical.

Pour commencer, positionnez la souris sous sédation de 8 semaines vers l’arrière et préparez la queue avec de l’alcool isopropylique à 70 %. À l’aide d’un pied à coulisse, mesurez le diamètre de la queue par incréments de 5 millimètres à partir de 20 millimètres de la base de la queue. Marquez une incision circonférentielle de 3 millimètres sur la queue à 20 millimètres de la base.

Sous grossissement microscopique chirurgical, effectuez une excision cutanée méticuleuse de 3 millimètres sur toute l’épaisseur, en laissant intact tout le système vasculaire sous-jacent. Inciser une marque circonférentielle supérieure, d’abord à travers le derme, suivie d’une incision circonférentielle de pleine épaisseur à 3 millimètres de la première incision. Faites une incision verticale perpendiculaire de pleine épaisseur pour relier les deux incisions, puis utilisez un ramasseur fin denté pour saisir un bord d’attaque et disséquer profondément dans le plan avasculaire jusqu’au derme et superficiel à l’adventice veineuse, avec des microciseaux.

Injecter 0,1 millilitre de bleu d’isosulfan à 1 % par voie sous-cutanée à l’extrémité de la queue. Identifiez les deux canaux lymphatiques apparaissant en bleu en raison de l’injection, adjacents aux veines latérales de la queue. Transectez les lymphatiques avec soin, en disséquant un plan entre la veine latérale et le lymphatique avec des ciseaux microchirurgicaux droits. Passez la pointe d’une lame de ciseau entre le vaisseau lymphatique et la veine latérale, et fermez les lames pour transecter le vaisseau lymphatique. Lorsque vous avez terminé, pansez la plaie de la queue avec un pansement transparent adhérent stérile.