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L’infection des voies urinaires, ou IVU, est principalement causée par la colonisation de la bactérie E. coli uropathogène dans les reins, les uretères, la vessie ou l’urètre.
Pour générer un modèle murin d’infection urinaire, commencez par placer une souris anesthésiée en position couchée. À l’aide d’un stéréomicroscope, visualisez la région abdominale inférieure de la souris pour localiser l’ouverture urétrale rose foncé.
Maintenant, prenez une seringue contenant la solution bactérienne uropathogène souhaitée avec un embout d’angiocathéter attaché à celle-ci. Insérez le cathéter perpendiculairement dans l’urètre. Inclinez la seringue pour la positionner horizontalement et poussez-la plus loin jusqu’à ce qu’elle atteigne la vessie.
Ensuite, instillez lentement l’inoculum bactérien dans la vessie. Maintenez la seringue et le cathéter en place pendant la durée souhaitée pour éviter les fuites. Rétractez lentement le cathéter de l’urètre et laissez les bactéries proliférer.
Une fois à l’intérieur, la population bactérienne envahit les cellules épithéliales superficielles de la vessie, où elles se répliquent pour former des communautés bactériennes intracellulaires, ou IBC, dans le cytoplasme de ces cellules.
Finalement, ces bactéries se libèrent dans la lumière de la vessie, où elles infectent les cellules voisines, provoquant la propagation de l’infection.
Le modèle murin d’infection urinaire est maintenant prêt pour une analyse plus poussée en aval.
Montez un embout d’angiocathéter stérile de calibre 24 sur une seringue de 100 microlitres. Remplissez la seringue avec la solution bactérienne préparée. Placez un animal sur une surface de travail en position couchée et maintenez une anesthésie stable à l’isoflurane à l’aide d’un cône nasal pendant l’instillation. Appliquez la pommade pour les yeux. Expulsez l’urine résiduelle en appliquant une légère compression et en effectuant des mouvements circulaires sur la région sus-pubienne. Ensuite, nettoyez le bas-ventre avec de l’éthanol à 70 %.
Lubrifiez l’extrémité du cathéter avec une solution saline normale. Placez l’index de la main non dominante sur l’abdomen et poussez-le doucement vers le haut. Commencez le cathétérisme de l’urètre verticalement dans un angle de 90 degrés. Une fois qu’une résistance est rencontrée, inclinez-la horizontalement avant de l’insérer davantage. Effectuez une instillation lente de 50 microlitres de l’inoculum bactérien. Après l’instillation, maintenez la seringue et le cathéter en place pendant quelques secondes de plus, puis rétractez-les lentement pour éviter les fuites.