Modélisation de l’occlusion trachéale fœtale transutérine dans un modèle murin : une procédure chirurgicale pour la ligature de la trachée fœtale chez une souris enceinte

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Placez une souris enceinte anesthésiée de l’âge de gestation souhaité en position couchée. Stérilisez la région abdominale. Effectuez une laparotomie, une incision chirurgicale à travers la paroi abdominale. Disséquez les muscles abdominaux pour exposer la cavité abdominale.

Identifiez les cornes utérines – de longues structures tubulaires qui abritent plusieurs fœtus – leur permettant de se développer simultanément. Extériorisez doucement les cornes utérines de la cavité abdominale, en les positionnant dans une orientation transversale. De plus, visualisez le cou de l’embryon de souris candidat.

Insérez doucement une aiguille chirurgicale avec la suture d’épaisseur appropriée transversalement à travers la région de la corne utérine, loin du placenta. Avancez l’aiguille plus loin vers la partie antérieure du cou où se trouve la trachée. Dirigez l’aiguille pour qu’elle sorte du cou à l’opposé de la corne utérine. Serrez soigneusement la suture pour obstruer la trachée, assurant ainsi l’intégrité de la paroi utérine. Remettez les cornes utérines dans la cavité abdominale.

Injectez une solution saline chaude dans la cavité péritonéale pour faciliter la progression de la grossesse. Fermez l’incision chirurgicale et laissez la souris récupérer. Le modèle d’occlusion trachéale fœtale de souris établi peut être utilisé pour étudier l’impact de la trachée occluse sur le développement pulmonaire.

Nettoyez la surface abdominale avec de l’alcool et de la povidone iodée et maintenez des conditions stériles tout au long de l’opération. Effectuez une incision verticale pour la laparotomie des mères enceintes et coupez toutes les couches séparément. Identifiez les cornes utérines de chaque côté et déterminez les fœtus candidats à la chirurgie.

Opérez deux fœtus dans chaque corne utérine s’il y a un nombre pair de fœtus de chaque côté, et sur un fœtus dans chaque corne utérine s’il y a un nombre impair. À l’aide de lunettes à grossissement 2x pour la visualisation, positionnez la corne utérine de manière transversale. Positionnez les chiots vers le haut entre deux doigts en utilisant les yeux et la queue comme guide.

Appliquez une légère pression sur la tête du chiot pour permettre l’extension de la tête et la visualisation du cou. Effectuez une occlusion trachéale, ou TO, à l’aide d’une aiguille atraumatique et d’une suture en polypropylène 6-0. Gardez le placenta sur le côté et loin des points d’entrée et de sortie de l’aiguille.

Insérez l’aiguille transversalement à travers le côté de l’utérus, loin du placenta, à travers le tiers de la partie antérieure du cou. Ensuite, déplacez doucement l’aiguille vers la ligne médiane du cou. Dirigez-le vers la partie antérieure, puis, sortez du cou entre la trachée et à l’opposé de la gaine carotide et de l’utérus.

Noeudez la suture en prenant soin de maintenir l’intégrité des membranes et de la paroi utérine. Replacez la corne utérine dans l’abdomen et injectez 2 millilitres de solution saline chaude et stérile dans la cavité péritonéale avant la fermeture.

Placez une suture polyglactine 5-0 pour fermer la paroi abdominale et fermez la peau avec une suture en soie non courante. Appliquez 0,1 mg/kg de buprénorphine par voie intrapéritonéale pour l’analgésie et laissez la mère se rétablir dans un incubateur chaud. Observez que l’animal opéré peut se nourrir tout seul et le garder seul dans sa cage individuelle.