Biopsie par pincement guidée par coloscopie dans un modèle murin : une technique pour visualiser et extraire des échantillons de tissus du côlon de souris

Dans des conditions pathologiques, la coloscopie permet de visualiser le côlon et l’extraction tissulaire par biopsie par pincement pour une analyse détaillée des plaies inflammatoires.

Pour effectuer une biopsie par pincement guidée par coloscope chez une souris, commencez par une biopsie. L’ensemble contient une unité de connexion, une gaine d’endoscope avec un coloscope pré-inséré de diamètre optimal. Le coloscope est connecté à une source lumineuse, à une source vidéo, à un port de gaz et à un port d’instrument pour pince à biopsie.

Ensuite, préparez une souris anesthésiée en position couchée sur la plate-forme de coloscopie. Tirez la queue vers le haut et utilisez une aiguille à gavage pour infuser l’anus avec un tampon approprié pour évacuer toute matière fécale. Ensuite, insérez le coloscope dans l’anus et avancez-le dans le rectum. Continuez à déplacer le coloscope plus loin vers le côlon tout en pompant de l’essence pour maintenir le côlon gonflé.

Ensuite, dirigez la pince hors du port de l’instrument et ouvrez les mâchoires. Faites pivoter la pince à angle droit pour induire une plaie d’une profondeur optimale. Les plaies trop peu profondes ou trop profondes entraînent respectivement une plaie superficielle ou une perforation du côlon. Ensuite, à l’aide d’une pince à biopsie, pincez le tissu du côlon. Le tissu extrait et la plaie induite peuvent être analysés plus en détail pour comprendre la physiopathologie.

Avant de commencer l’intervention, insérez un endoscope à alésage rigide de 1,9 millimètre dans une gaine d’endoscope et fixez l’endoscope assemblé à la source lumineuse et à l’appareil d’imagerie vidéo conformément aux instructions du fabricant. Utilisez le tube fourni pour fixer la pompe à air à la vanne de gaz sur le côté gauche de la gaine, à côté du canal de travail.

Assurez-vous que le canal de travail est en position ouverte et insérez une pince à biopsie 3 Fr dans le canal de travail. Avancez la pince jusqu’à l’extrémité de la gaine sans dépasser de la gaine.

Ensuite, placez la souris anesthésiée sur une plate-forme de stadification endoscopique sur sa face ventrale et confirmez le niveau de sédation approprié par absence de réponse au réflexe de pédale. Après avoir appliqué une pommade pour les yeux, remplissez une seringue de 3 millilitres avec une aiguille de gavage de rat attachée avec du PBS à température ambiante et insérez l’aiguille à environ 1 centimètre dans l’anus de la souris. Infuser doucement avec du PBS jusqu’à ce que les matières fécales aient été éliminées. Plusieurs boulettes fécales doivent sortir de la souris avec le PBS qui a été perfusé.

Insérez l’endoscope assemblé à 0,5 centimètre dans l’anus et avancez la pince à biopsie dans la lumière dégagée du rectum jusqu’à ce que les « mâchoires » complètes de la pince dépassent l’extrémité de la gaine. Tournez la pince de 90 degrés de sorte que les mâchoires s’ouvrent dans une orientation est-ouest, puis ouvrez les pointes et avancez la pince d’environ 1 centimètre, en fermant et en rétractant la pince en un mouvement rapide et fluide pour prélever la biopsie. Pour éviter d’insuffler complètement le côlon pendant la biopsie, laissez le côté droit de la valve de gaz ouvert.