Modèle de plaie murine guidée par coloscopie : une méthode pour isoler le lit de plaie induite par la biopsie du côlon afin de comprendre le processus de guérison

0 vues2:48 min • July 8th, 2025

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Les biopsies guidées par colopsie dans des modèles murins induisent des sites de plaie dans le côlon. Ces lits de plaies sont isolés pour des études moléculaires et histologiques afin de comprendre le processus de cicatrisation des plaies dans les maladies inflammatoires du tractus gastro-intestinal, ou tractus gastro-intestinal.

Pour commencer l’isolement du lit de la plaie, placez une souris expérimentale euthanasiée avec une plaie induite par le coloscope en position couchée. Inciser la peau abdominale et les muscles sous-jacents pour exposer la cavité corporelle.

Placez des ciseaux fermés sous le côlon et soulevez-le. Coupez le côlon à son milieu et à l’anus pour le séparer du corps. Rincez le côlon avec un tampon approprié pour éliminer le contenu fécal.

Placez le côlon sur du papier filtre et ouvrez-le longitudinalement, le côté mésentérique vers le bas sur le papier filtre. Maintenant, ajoutez un colorant bleu de méthylène sur le côlon et observez au microscope.

Le colorant tache les tissus morts et granulés dans le lit de la plaie, ce qui le fait paraître plus foncé que les tissus sains environnants, ce qui permet son identification facile. Préserver le lit de plaie isolé pour les études d’expression génique.

Au point final expérimental approprié, ouvrez les couches de la peau et des muscles abdominaux pour exposer la cavité corporelle de l’animal de laboratoire, et placez des pinces fermées sous le côlon. Soulevez doucement le côlon pour le libérer du mésentère sous-jacent et coupez le tissu à son milieu et à l’anus pour le recueillir sur la souris.

Utilisez une seringue de 20 millilitres remplie de PBS glacé et équipée d’une aiguille de gavage pour rats pour rincer le contenu fécal et placez le côlon nettoyé sur un morceau de papier filtre. Ouvrez le côlon longitudinalement, en prenant soin que la face mésentérique soit face vers le bas contre le papier filtre, et utilisez une pipette Pasteur pour couvrir la muqueuse avec 0,2 % de bleu de méthylène.

Après quelques secondes, égouttez l’excès de coloration et observez le côlon sous un microscope à dissection pour localiser le lit de la plaie. Utilisez des ciseaux à micro-iris de 4 pouces pour couper le bord du lit, en prenant soin de ne pas couper la couche musculaire, et utilisez une pince à épiler à pointe fine pour transférer le tissu disséqué dans un tube pour la congélation et/ou le stockage.

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Dernière mise à jour : 22 août 2026