Isolation des myofibres : une technique pour obtenir des myofibres uniques à partir d’un muscle extenseur digitorum long (EDL) de souris récolté

Commencez avec une souris euthanasiée en position couchée. Stérilisez son postérieur. Retirez chirurgicalement la peau et le fascia (une mince enveloppe de tissu conjonctif sous la peau) pour exposer les muscles sous-jacents des membres postérieurs.

Localisez le muscle tibial antérieur ou TA sur la face latérale du tibia. En tenant le tendon distal TA, détachez le muscle du tissu sous-jacent. Coupez le muscle près du genou pour exciser le muscle TA, révélant le muscle long extenseur des doigts ou EDL sous-jacent situé dans le compartiment antérieur de la patte postérieure.

Incisez le tendon distal de l’EDL et tirez le muscle EDL vers le genou. Coupez le tendon proximal de l’EDL pour exciser le muscle EDL. Transférez le muscle prélevé dans un tube avec un milieu préchauffé contenant des enzymes collagénases et incubez pendant la durée appropriée. Les collagénases décomposent le tissu conjonctif entourant chaque fibre musculaire ou myofibre dans le muscle. Cette étape de digestion détache les myofibres de la couche interne du muscle.

Après l’incubation, transférez soigneusement le muscle digéré dans une plaque multipuits contenant un milieu préchauffé pour augmenter le taux de survie