Modèle murin d’endophtalmie bactérienne : procédé de génération d’endophtalmie bactérienne par injection intravitréenne d’une suspension bactérienne dans l’œil d’une souris

0 vues3:57 min • July 8th, 2025

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L’endophtalmie bactérienne est une infection oculaire inflammatoire due à l’invasion intraoculaire de la bactérie Bacillus cereus.

Pour générer une endophtalmie bactérienne dans un modèle de souris, placez une souris anesthésiée latéralement sur la planche de chirurgie. Clampez la peau périoculaire pour déplacer le globe oculaire et localiser la région du limbe - un point d’intersection de la sclérotique et de la cornée dans l’œil.

Prenez une aiguille pré-remplie avec la suspension de culture de Bacillus cereus. Insérez l’aiguille au niveau du limbe et percez la région du vitré moyen. Ensuite, injectez la suspension bactérienne par voie intravitréenne, libérant les bactéries dans la cavité vitrée de l’œil.

Maintenant, retirez l’aiguille et laissez le globe oculaire retrouver sa position naturelle. Transférez la souris dans une cage et surveillez la propagation de l’infection bactérienne. Une fois à l’intérieur, les bactéries se répliquent rapidement pour augmenter en nombre. Par la suite, ces bactéries utilisent leurs flagelles pour migrer vers la rétine.

Lorsqu’elles atteignent l’espace vitréo-rétinien, les bactéries sécrètent des toxines et des enzymes, qui les aident à envahir la rétine. À l’intérieur de la rétine, les protéines de l’enveloppe bactérienne activent les cellules de Muller rétiniennes, produisant des médiateurs inflammatoires pour recruter des cellules inflammatoires qui endommagent les cellules rétiniennes délicates. Finalement, un afflux de cellules inflammatoires à l’intérieur de l’œil provoque une endophtalmie dans l’œil de la souris.

Pour l’injection intravitréenne, allumez le micro-injecteur et ouvrez le robinet de gaz sur le réservoir d’air comprimé fixé au micro-injecteur. Appuyez sur « Mode » sur l’injecteur jusqu’à ce que l’écran affiche « Balance ». Appuyez sur « Balance » et placez la souris de l’ordinateur sur la table d’opération. Connectez le support de pipette en acier inoxydable au tube fixé au « Fill/Output » de l’injecteur, et vissez fermement le connecteur du support de pipette autour d’une aiguille de pointe de pipette capillaire en verre biseauté pour permettre l’insertion de l’aiguille capillaire dans l’autre extrémité du support de pipette.

Allumez le microscope ophtalmique et réglez l’intensité lumineuse sur 50 %. Placez le microscope sur le côté de la procédure et ajustez le microscope à la mise au point souhaitée. Après avoir confirmé une absence de réponse au reflux de la pédale, placez la souris anesthésiée sur son côté gauche sur les sous-tapis médicaux, le nez pointé vers la droite.

Localisez l’œil droit à travers l’objectif du microscope ophtalmique et placez les pinces d’une pince à action inverse de chaque côté de l’œil pour exposer le site d’injection. Faites un clic gauche de la souris connectée au micro-injecteur pour remplir l’aiguille capillaire préparée avec la solution bactérienne diluée, et en fixant la tête avec la main gauche, placez la pointe de l’aiguille, côté biseauté vers le haut au niveau du limbe de l’œil.

Avec l’aiguille à un angle de 45 degrés, percez l’œil en veillant à ce que seulement 0,5 millimètre de la pointe pointue de l’aiguille soit inséré. Une fois la pointe de l’aiguille insérée, utilisez la main gauche pour faire un clic droit sur le tapis de souris pour injecter 0,5 microlitre de la solution de B. cereus. Pour éviter les fuites, laissez la pointe de l’aiguille à l’intérieur de l’œil de la souris pendant 2 à 3 secondes avant de la retirer. Ensuite, relâchez la pince et l’œil retournera dans l’orbite tout seul. Transférez la souris dans une cage de récupération sur un coussin chauffant avec surveillance jusqu’à ce qu’elle soit complètement couchée.

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Dernière mise à jour : 1 août 2026