JoVE Encyclopedia of Experiments
Biologie
0 vues • 3:03 min • July 8th, 2025
Les porcs ont des poumons multilobés - un organe de respiration apparié - entourant le cœur dans la cavité thoracique. La trachée permet le passage de l’air vers et depuis les poumons. Il se ramifie en deux voies respiratoires principales ou bronches, menant aux poumons.
Dans les poumons, les bronches se divisent en voies respiratoires de plus en plus petites, et les plus petites branches terminales des voies respiratoires sont appelées bronchioles. Les bronchioles mènent à de minuscules sacs aériens en forme de ballon appelés alvéoles, qui sont les sites d’échange gazeux dans les poumons.
Pour isoler des coupes de tissu bronchiolaire, commencez par placer des poumons porcins fraîchement récoltés sur une plate-forme stérile. La chaleur stérilise la surface ventrale de la plèvre - mince structure membraneuse tapissant les poumons - pour éliminer les contaminants de surface des tissus. Cette étape facilite également l’incision facile de la plèvre dans les étapes suivantes.
Inciser sur toute la longueur du poumon et exciser les tissus environnants pour exposer le cartilage de la bronche. De plus, faites une incision transversale au point le plus élevé de la bronche pour la détacher de la trachée.
En tenant l’extrémité libre de la bronche, séparez doucement la longueur de la bronche avec les bronchioles du tissu alvéolaire environnant. Rincez la section bronchiolaire excisée avec un média approprié. La coupe de tissu bronchiolaire est prête pour d’autres expérimentations.
Prélever les poumons immédiatement après l’abattage et les transporter au laboratoire dans une glacière domestique. Travailler sur une surface stérilisée et sous une flamme. Placez les poumons sur une planche à découper en plastique propre recouverte de papier d’aluminium autoclavé et vérifiez que les bronchioles restent intactes. Les poumons ne sont pas adaptés à l’utilisation s’il y a eu des dommages à l’abattoir ou pendant le transport.
Chauffez un couteau à palette sous une flamme et touchez très brièvement le couteau à la zone du poumon entourant la bronchiole pour stériliser la surface du tissu. Coupez le tissu superficiel entourant la bronchiole à l’aide d’une lame de rasoir stérile, en faisant des incisions parallèles à la bronchiole pour éviter tout dommage.
Une fois la bronchiole exposée, faites une incision transversale à travers la bronchiole au point le plus haut visible. À l’aide d’une pince stérile, tenez légèrement l’extrémité libre de la bronchiole et coupez tout tissu indésirable restant à l’aide d’une lame de rasoir stérile montée. Faites une dernière incision transversale à travers la bronchiole avant qu’une ramification ne soit visible pour retirer la bronchiole des poumons.
Cet article détaille la structure anatomique des poumons de porc et fournit un protocole pour l'isolement de sections de tissu bronchiolaire. La méthodologie garantit l'intégrité du tissu pour des expériences ultérieures.
L'extraction fiable de tissu bronchiolaire intact à partir de poumons porcins permet le développement de modèles d'infection ex vivo physiologiquement pertinents pour la découverte de médicaments respiratoires. Cette capacité soutient la validation précoce des cibles thérapeutiques et la réduction des risques mécanistiques dans la recherche sur les infections pulmonaires chroniques, en particulier pour des pathogènes tels que Pseudomonas aeruginosa et Staphylococcus aureus. Une préparation standardisée des tissus améliore la fiabilité prédictive et la continuité translationnelle à travers les flux de travail précliniques.
Ce protocole d'extraction tissulaire s'inscrit à l'interface entre la découverte précoce et le développement de modèles précliniques, permettant la création de modèles d'infection robustes destinés au criblage en aval et à la recherche translationnelle.
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Dernière mise à jour : 29 août 2026