Isolement des cellules endothéliales de l’aorte porcine (pAEC) : une méthode enzymatique pour isoler les cellules endothéliales de l’aorte abdominale porcine prélevée
0 vues • 4:50 min • July 8th, 2025
L’aorte - l’artère principale transportant le sang oxygéné du cœur vers le corps - est composée de trois couches ou « tuniques » : une intima interne, une médiane moyenne et une acécutive externe. Les cellules endothéliales ou EC sont présentes dans l’intima sous la forme d’une monocouche mince et continue sur une membrane basale de soutien composée de protéines structurales, principalement du collagène.
Pour isoler les CE, commencez par une aorte porcine récoltée dans une boîte de culture. Exciser ses extrémités et tout tissu adhérent environnant pour éviter la contamination des cellules non endothéliales. Lavez l’aorte avec un tampon contenant des antibiotiques pour inhiber la croissance microbienne.
Passez une suture chirurgicale stérile dans l’aorte et attachez l’une de ses extrémités, en maintenant la suture dans la lumière. Fixez l’extrémité attachée et rétractez la suture pour inverser complètement l’aorte. Cela expose l’intima contenant des CE à la digestion enzymatique. Traitez l’aorte avec une solution de collagénase préchauffée et peu concentrée pour une activité enzymatique optimale et incubez.
La collagénase décompose les protéines de collagène présentes dans la membra
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