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Pour générer un modèle d’infection osseuse bactérienne, commencez par placer un lapin anesthésié en position latérale. Retirez la fourrure de la patte arrière pour localiser le tibia - l’os reliant le genou à la cheville. Marquez un point adjacent au plateau tibial - l’extrémité proximale de l’os du tibia.
Inciser la peau et le périoste - une couche de tissu autour de l’os - exposant le tibia. À l’aide de la référence marquée, faites une cavité dans la moelle osseuse. Insérez un bouchon de cire d’os dans la cavité. Suturez le périoste et les couches de la peau.
Ensuite, prenez une seringue contenant une solution de Staphylococcus aureus. Percez l’aiguille dans le bouchon de cire osseuse et inocunez la solution bactérienne dans la moelle osseuse. Éjectez l’aiguille. Transférez le lapin dans une cage et surveillez la propagation de l’infection.
Le bouchon de cire osseuse empêche la fuite de la suspension bactérienne, ce qui permet aux bactéries de proliférer dans la moelle osseuse. Ces bactéries attirent les leucocytes et les facteurs inflammatoires conduisant à l’ostéomyélite - une inflammation dans l’os provoquant une réduction de l’apport sanguin.
Ces conditions finissent par conduire à la formation d’un séquestre - une zone nécrotique de l’os dépourvue d’apport sanguin. Les bactéries s’infiltrent davantage dans cette zone pour échapper au traitement antibiotique, ce qui entraîne une infection chronique.
Pour mettre en place le moule d’infection osseuse, confirmez une absence de réponse au pincement de la patte chez un lapin blanc de Nouvelle-Zélande mâle de trois mois et pesant 3 kilogrammes, et utilisez un rasoir électrique pour enlever les poils de la région tibiale proximale dans le sens inverse de la croissance des poils. Désinfectez la peau exposée avec une solution de povidone iodée et utilisez un stylo et une règle pour marquer l’extrémité supérieure du tibia et la position du trou de forage pour l’injection de S. aureus, en veillant à ce que la position du trou de forage se trouve au milieu horizontal du plateau tibial.
Ensuite, utilisez un scalpel #11 pour faire une incision dans la peau, suivie d’une incision de 1 centimètre dans le péritoine. À l’aide d’une perceuse à os électrique, percez un trou de 2 millimètres de diamètre dans le tibia et appuyez sur le trou avec un cylindre de cire osseuse de 2 millimètres de diamètre et de 2 millimètres de long. Retirez toute cire osseuse de rechange le long du plan horizontal du plateau tibial et confirmez que le trou est plein de cire osseuse.
Ensuite, utilisez des sutures chirurgicales résorbables pour recoudre le périoste et la peau, dans une suture verticale du matelas pour empêcher l’animal de mâcher les points de suture, et utilisez un injecteur d’asepsie de 1 millilitre pour injecter lentement 1 x 108 UFC/mL de solution de S. aureus dans le trou de forage.