Transfert d’embryons chez le lapin : procédure de transfert guidé par laparoscopie d’embryons dans l’oviducte d’un modèle de lapine receveuse en ovulation

Pour effectuer le transfert d’embryons, prenez une lapine non fécondée. Injectez au lapin par voie intramusculaire un analogue synthétique de l’hormone de libération des gonadotrophines. Cette procédure induit l’ovulation et permet à la lapine de présenter une pseudo-grossesse - une condition où le corps présente des symptômes semblables à ceux de la grossesse sans avoir un fœtus viable, ce qui augmente les chances de survie de l’embryon dans les étapes ultérieures.

Anesthésez le lapin et placez-le en décubitus dorsal, en position inclinée, les pieds surélevés au-dessus de sa tête. Cette position déplace les organes abdominaux vers le haut, assurant un écart suffisant avec les organes reproducteurs. Faites une ouverture dans la partie antérieure de la région abdominale. Utilisez cette zone pour insérer une caméra endoscopique à l’intérieur de la cavité péritonéale afin de visualiser le système reproducteur.

Maintenant, prenez un ensemble seringue-cathéter contenant des embryons viables. Insérez l’aiguille près de l’oviducte – un canal qui fait passer l’embryon vers l’utérus. Faites avancer le cathéter à travers l’extrémité de la cavité en forme d’entonnoir ou de l’infundibulum jusqu’à ce qu’il atteigne l’ampoule – une position tubulaire longue de l’oviducte.

Libérez les embryons dans l’ampoule. Rétractez le cathéter et retirez la caméra. Scellez le site de l’incision. Transférez le lapin dans sa cage et surveillez-le. Les embryons migrent de la région ampullaire vers la corne utérine, la partie de l’utérus où se produit l’implantation. Des embryons sains sont implantés, ce qui conduit finalement à une grossesse réussie.

Le jour du transfert, rincez les embryons frais ou décongelés dans un milieu de base à 37 degrés Celsius au microscope stéréoscopique et fixez un cathéter péridural de calibre 17 configuré de manière appropriée à une seringue de 1 millilitre. Aspirez un centimètre de milieu de base dans le cathéter, suivi d’une petite bulle d’air. Ensuite, aspirez 5 à 7 embryons et 10 microlitres de milieu de base, suivis d’une autre petite bulle d’air dans un dernier centimètre de milieu de base.

Une fois que les embryons ont été chargés, placez un lapin receveur anesthésié dans une cage sur une phase de réchauffement et appliquez une pommade sur les yeux de l’animal. Après avoir confirmé une absence de réponse au réflexe de pédale, rasez la fourrure de l’abdomen ventral, nettoyez la zone chirurgicale avec du savon au gluconate de chlorhexidine et enlevez tous les poils restants.

Couvrez la zone avec un champ stérile avec un trou pour la zone chirurgicale et insérez un trocart endoscopique de 5 centimètres dans la cavité abdominale, de 2 centimètres caudaux jusqu’au processus xiphoïde, et utilisez un insufflateur mécanique régulateur de pression pour gonfler la cavité péritonéale.

Insérez la caméra de l’endoscope à travers le trocart endoscopique et insérez l’aiguille épidurale de calibre 17 dans la région inguinale à 2 à 3 centimètres de l’infundibulum. Insérez le cathéter chargé à travers l’aiguille péridurale dans l’abdomen et insérez 1 à 2 centimètres du cathéter épidural à travers l’infundibulum de l’ampoule.

Appuyez doucement sur le piston du cathéter pour libérer les embryons dans l’oviducte. Les deux bulles d’air doivent sortir du cathéter. Retirez le cathéter juste après la libération des embryons, puis aspirez et libérez le milieu restant pour confirmer l’absence des embryons.

Après avoir confirmé que le transfert des embryons a réussi, retirez l’aiguille de la péridurale et la caméra de l’endoscope, puis libérez le dioxyde de carbone abdominal à travers le trocart endoscopique. Nettoyez l’incision du trocart avec une solution de chlorhexidine et fermez la plaie avec un pansement en aluminium micronisé et en plastique. Ensuite, traitez l’animal avec les antibiotiques et les analgésiques appropriés et surveillez-le jusqu’à ce qu’il se rétablisse complètement.