Micro-injection de cellules robotisées guidée par l’image : une technique automatisée à haut débit pour l’administration précise de polysaccharides marqués par fluorescence dans des cellules neuronales uniques dans des cultures de coupes cérébrales organotypiques

Pour effectuer une micro-injection de cellules robotisées, commencez par charger une solution de polysaccharide biocompatible réfrigérée et marquée par fluorescence dans une aiguille de micro-injection optimisée. Montez l’aiguille chargée sur le support d’un micromanipulateur programmable pour un positionnement précis de l’aiguille lors de la microinjection.

Transférez une boîte de culture contenant des tranches de tissu cérébral organotypique embryonnaire de souris dans un milieu sur une platine de microscope chauffée pour maintenir les conditions physiologiques des tissus. Concentrez-vous sur la surface basale de la tranche de tissu cérébral, qui comprend des neurones pyramidaux, et immergez l’aiguille dans un milieu pour la positionner près des neurones à micro-injecter.

Ajustez la pression de compensation pour éviter le reflux du fluide dans l’aiguille par capillarité.

À l’aide d’un logiciel, définissez la trajectoire et l’angle de l’aiguille. Positionnez l’aiguille au point de départ de la trajectoire cartographiée et lancez le cycle de micro-injection automatisé.

L’aiguille se déplace sur une distance spécifiée vers la cellule cible. La force appliquée fait que l’aiguille app