Administration hydrodynamique de gènes : une technique de transfection in vivo d’ADN exogène dans des hépatocytes murins par injection dans la veine caudale
Encyclopédie des expériences JoVE
Techniques biologiques
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Pour effectuer le transfert hydrodynamique de gènes, il faut commencer par prendre une seringue remplie d’une solution saline contenant des plasmides recombinants porteurs du gène d’intérêt. Par la suite, prenez un modèle de souris et injectez rapidement un grand volume de solution plasmidique à la base de la queue, en veillant à ce que la solution plasmidique soit injectée par voie intraveineuse dans la veine de la queue.
L’injection pressurisée d’un volume élevé de plasmides génère une force mécanique appelée force hydrodynamique, qui augmente la pression intravasculaire dans la veine cave inférieure - une veine qui transporte le sang désoxygéné vers le cœur.
Un grand volume de liquide induit une congestion dans le ventricule droit du cœur, forçant l’inversion dans le sens du sang. Cette étape force la solution plasmidique à pénétrer dans la veine hépatique, qui la transporte vers le foie.
Les plasmides se déplacent à l’intérieur des sinusoïdes hépatiques - les espaces du foie tapissés par les cellules endothéliales. L’augmentation du volume sanguin aide les plasmides à perméabiliser la couche endothéliale, ce qui les aide à se rapprocher des hépatocytes environnants - les cellul
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