Administration de gènes in vitro médiée par électroporation : une technique d’impulsion électrique pour introduire des plasmides codant pour des protéines rapporteures fluorescentes dans des cellules en culture

Pour l’administration d’ADN plasmidique basée sur l’électroporation dans les cellules neuronales primaires, commencez par une suspension des cellules dans un milieu d’électroporation approprié. Ajoutez de l’ADN plasmidique codant pour des protéines fluorescentes pour préparer le mélange d’électroporation.

Transférez doucement le mélange d’électroporation dans une cuvette d’électroporation, en évitant les bulles d’air qui pourraient affecter négativement l’efficacité de l’électroporation. Transférez la cuvette dans le porte-cuvette de l’électroporateur ; Réglez les paramètres d’électroporation. Initier l’électroporation.

Les courtes impulsions électriques à haute tension appliquées à travers la membrane cellulaire provoquent une accumulation de charge différentielle de chaque côté de la membrane, augmentant le potentiel transmembranaire, la tension à travers la membrane cellulaire.

Lorsque le potentiel transmembranaire induit dépasse le potentiel de dégradation de la bicouche lipidique, la bicouche lipidique se déstabilise avec le changement de configuration localisé, formant des pores hydrophiles transitoires sur la membrane cellulaire. Les pores de taille adéquate fournissent une