Encyclopédie des expériences JoVE
Techniques biologiques
0 vues • 3:23 min • July 8th, 2025
Pour administrer des plasmides dans les noyaux de sporozoïtes par nucléofection, commencez par une suspension de sporozoïtes isolés et viables - stade mobile et infectieux des parasites - en tampon. Les sporozoïtes sont des cellules de forme mince entourées d’une membrane plasmique externe et d’un complexe de membrane interne sous-jacent composé d’une série de vésicules aplaties et de protéines essentielles à la stabilité structurelle et à la motilité.
Centrifuger la suspension pour granuler les sporozoïtes. Remettre en suspension la pastille de sporozoïte dans un volume approprié de tampon de transfection nucléaire, complété par des plasmides codant pour des protéines fluorescentes. Le tampon de transfection nucléaire avec une capacité tampon et une force ionique élevées assure une transfection efficace tout en préservant la fonctionnalité du sporozoïte.
Transférez la suspension dans une cuvette de transfection nucléaire. Placez la cuvette dans le support d’un dispositif de nucléification. Exécutez le programme de nucléofection approprié.
Lors de la nucléofection, des impulsions courtes et à haute tension, ainsi que des constituants tampons, perturbent temporairement la membrane p
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