Transfection in vitro basée sur la magnétoflexion : une technique assistée par champ magnétique pour délivrer des plasmides dans des cellules neuronales primaires de souris à l’aide de nanoparticules magnétiques

Commencez par l’ADN plasmidique codant pour des protéines fluorescentes ou la suspension d’ADNp dans un milieu. Ajoutez des nanoparticules magnétiques biocompatibles, recouvertes de polymères cationiques, à la suspension d’ADNp et incuberez.

Les polymères cationiques chargés positivement interagissent et se conjuguent électrostatiquement avec l’ADNp chargé négativement, ce qui entraîne la condensation de l’ADNp et la formation de « polyplexes magnétiques » avec une charge positive globale.

Maintenant, transférez le mélange polyplex dans une plaque multi-puits contenant une culture de cellules neuronales de souris primaires adhérentes. Montez la plaque multipuits sur une plaque magnétique et incuberez.

Le champ magnétique généré par la plaque magnétique provoque la sédimentation et l’accumulation des polyplexes à la surface des cellules neuronales. Ce contact étroit avec la surface cellulaire facilite la liaison non spécifique des polyplexes chargés positivement aux protéoglycanes associés à la membrane cellulaire chargés négativement.

Par la suite, les polyplexes sont internalisés par endocytose - un processus dans lequel les régions locales de la membrane cellulaire s’invaginent e