Encyclopédie des expériences JoVE
Techniques biologiques
0 vues • 2:44 min • July 8th, 2025
La stéatose hépatique est une affection pathologique caractérisée par une accumulation excessive de graisses dans les hépatocytes - un type de cellules hépatiques proéminent. Les graisses se déposent sous forme de gouttelettes lipidiques de tailles variables dans le cytoplasme des hépatocytes.
Structurellement, une gouttelette lipidique contient un noyau de graisses neutres et hydrophobes telles que les triglycérides et les esters de cholestérol. Le noyau est entouré d’une monocouche de phospholipides décorée de diverses protéines.
Pour visualiser le dépôt de graisse, prenez une plaque multi-puits contenant une culture d’hépatocytes adhérente. Les cellules sont prétraitées avec un milieu stéatogène pour induire l’accumulation de gouttelettes lipidiques à l’intérieur de celles-ci.
Ajoutez la concentration souhaitée de paraformaldéhyde, qui se diffuse dans les cellules et réticule, les protéines. Cette étape désactive les protéases et préserve la structure hépatocytaire. Jetez le paraformaldéhyde et ajoutez la solution Oil-red-O contenant le colorant organique dissous dans l’isopropanol.
L’isopropanol agit comme un solvant porteur pour les molécules Oil-red-O, peu solubles. Cela aide
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