Coloration rouge du Nil : une technique pour détecter et quantifier les lipides neutres intracellulaires dans les algues

Les algues sont des organismes photosynthétiques aquatiques qui produisent une variété de lipides, dont les lipides neutres sont essentiels à la production de biodiesel.

Pour détecter et quantifier les lipides neutres, mélangez un volume optimal de suspension d’algues et d’éthanol dans un puits de microtitration noire. La paroi cellulaire et la membrane des algues, qui empêchent la plupart des taches de pénétrer, deviennent perméables lorsqu’elles sont exposées à l’éthanol. Ensuite, combinez l’éthanol avec un colorant fluorescent liposoluble - le rouge du Nil. Ajoutez ce mélange dans le puits contenant des algues.

Placez la plaque de microtitration dans un spectrophotomètre. Établissez un programme qui assure l’incubation avec des secousses intermittentes pour faciliter l’interaction entre le colorant et les algues.

Comme le rouge du Nil est hydrophobe, il ne peut pas facilement traverser le cytoplasme. Des solvants tels que l’éthanol, lorsqu’ils sont associés au rouge du Nil, mobilisent le colorant et l’aident à atteindre les corps lipidiques dispersés dans le cytoplasme. Le rouge du Nil pénètre alors dans les corps lipidiques et s’y solubilise, colorant ainsi les lipides.

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