Coloration de von Kossa des cellules musculaires lisses vasculaires aortiques : une technique in vitro pour l’évaluation de la calcification de la couche médiale artérielle
Encyclopédie des expériences JoVE
Techniques biologiques
0 vues • 3:10 min • July 8th, 2025
Les cellules musculaires lisses vasculaires, ou VSMC, sont les composants cellulaires proéminents de la tunique moyenne - la couche intermédiaire de la paroi des vaisseaux sanguins. En réponse à des signaux pathologiques ou au vieillissement, ces cellules interviennent dans la calcification vasculaire - un phénomène d’accumulation de calcium dans la matrice extracellulaire.
Prenez une plaque multi-puits contenant une couche adhérente de culture VSMC aortique murine précalcifiée. Incuber les cellules avec une solution de formol pour réticuler les protéines cellulaires et stabiliser la structure VSMC avant la coloration.
Commencez la coloration de von Kossa en aspirant du formol du puits et en ajoutant une solution de nitrate d’argent. Incuber la plaque sous une source lumineuse appropriée.
Une fois que la solution de nitrate d’argent atteint les sites de calcification dans la matrice extracellulaire de la couche VSMC, les ions argent remplacent les ions calcium liés au phosphate. Il en résulte une coloration jaune transitoire. En présence de matière organique et de lumière, la dégradation photochimique du phosphate d’argent entraîne la formation d’argent métallique de couleur noire.
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