Encyclopédie des expériences JoVE
Techniques biologiques
0 vues • 3:14 min • July 8th, 2025
Pour une coloration spécifique au cytoplasme cellulaire dans les microenvironnements des tissus mous, obtenez un rein de souris fraîchement récolté. Traitez-le avec une solution fixatrice contenant du formaldéhyde, de l’acide acétique glacial et du méthanol. Incuber à basse température.
Le formaldéhyde pénètre dans les cellules, réticulant les protéines avec les protéines et les protéines avec les acides nucléiques. Le méthanol déplace l’eau des tissus et coagule les protéines. L’acide acétique provoque une acidification intracellulaire et un gonflement des tissus, contrecarrant ainsi le rétrécissement des tissus causé par le méthanol.
La fixation inactive les enzymes et stabilise la morphologie des tissus pour la coloration ultérieure. Retirez l’excès de fixateurs à l’aide d’un tampon. Incuber le tissu avec de l’éosine Y, un colorant acide.
L’éosine pénètre dans les cellules fixes et pénètre dans le cytoplasme. L’environnement acide du cytoplasme, issu du traitement à l’acide acétique, provoque une protonation maximale des groupes aminés des protéines cytoplasmiques.
L’éosine, avec des groupes fonctionnels chargés négativement, interagit électrostatiquement avec les groupes proton
Consultez la transcription complète et accédez à des milliers de vidéos scientifiques