Encyclopédie des expériences JoVE
Techniques biologiques
0 vues • 4:33 min • July 8th, 2025
Au cours des métastases cancéreuses, les cellules tumorales d’une tumeur primaire se déplacent dans le système circulatoire, extravasent vers des organes distants et établissent des tumeurs secondaires.
Pour évaluer les métastases pulmonaires dans un modèle murin de cancer du sein auquel on a injecté des cellules 4T1, des cellules cancéreuses du sein hautement métastatiques, préparez une suspension cellulaire, comprenant des cellules 4T1, isolées des poumons prélevés. Centrifuger la suspension et remettre les cellules en suspension dans un milieu contenant de la 6-thioguanine, 6-TG - un analogue de la guanine. Grainez la suspension cellulaire dans une plaque de culture.
La 6TG pénètre dans les cellules normales où une enzyme transférase spécifique la convertit en nucléotide 6-TG, un nucléotide toxique. Ces nucléotides cytotoxiques sont incorporés dans l’ADN, causant des dommages à l’ADN et éliminent sélectivement les cellules de la culture. Les cellules 4T1 ont une capacité réduite à former des nucléotides toxiques, ce qui facilite leur survie et leur adhérence à la plaque. En fonction de la capacité proliférative des cellules, elles forment des colonies.
Traitez les cellules avec
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