Coloration à la safranine-O : une méthode pour visualiser l’intégrité structurelle et la cellularité du cartilage

Pour la coloration du cartilage, commencez par une section de cartilage fixée au formol et contenue dans de la paraffine provenant d’une souris euthanasiée.

Tout d’abord, plongez l’échantillon dans le substitut de xylène - un agent nettoyant non dangereux qui élimine la cire de paraffine et expose les tissus déshydratés. Ensuite, traitez l’échantillon avec des concentrations décroissantes d’éthanol pour réhydrater le tissu en vue d’une coloration ultérieure.

Maintenant, colorez l’échantillon avec de l’hématoxyline de fer de Weigert - une coloration organique contenant des ions ferreux - et incubez brièvement. Les molécules d’hématoxyline forment des complexes avec des ions ferreux et pénètrent dans la cellule. Les ions ferreux agissent comme un mordant et facilitent la liaison de l’hématoxyline aux acides nucléiques, leur conférant une couleur bleue.

Ensuite, traitez l’échantillon avec le colorant vert rapide - une contre-coloration qui se lie au tissu conjonctif et donne une couleur verte. Ensuite, traitez l’échantillon avec une solution d’acide acétique pour stabiliser les molécules de colorant. Enfin, colorez l’échantillon avec de l’orange safranine - un colorant cationique - et