Encyclopédie des expériences JoVE
Techniques biologiques
0 vues • 2:50 min • July 8th, 2025
Les nerfs périphériques sont constitués d’axones entourés de cellules de Schwann qui s’enroulent autour des axones avec plusieurs couches de membranes cellulaires riches en lipides, formant la gaine de myéline.
Pour visualiser les nerfs périphériques, commencez par une lame de verre portant une section transverse de nerf périphérique de rat de rat fixe, incorporée dans de la résine et traitée au tétroxyde d’osmium. Les sections incrustées de résine aident à maintenir la morphologie des tissus.
Letraitement au tétroxyde d’osmium provoque le dépôt d’osmium métallique dans la couche lipidique de la gaine de myéline au site tissulaire.
Pipeter une solution alcaline de bleu de toluidine sur la section du tissu. Séchez la lame à une température appropriée. Les conditions alcalines et la chaleur facilitent la pénétration du bleu de toluidine à travers la résine dans la section du tissu.
Le bleu de toluidine, étant un colorant cationique, se lie aux groupes phosphate chargés négativement sur l’ADN et intercalé également entre les paires de bases de l’ADN dans les noyaux des cellules de Schwann. De plus, le colorant se lie à l’ARN dans le cytoplasme, à l’extérieur de la gaine de myéline.
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