Encyclopédie des expériences JoVE
Techniques biologiques
0 vues • 3:32 min • July 8th, 2025
Pour visualiser les régions cartilagineuses et osseuses dans une coupe de tissu, commencez par une lame de verre portant une fine section de tissu d’embryon de souris congelée d’intérêt.
Décongelez brièvement la cryosection et plongez-la dans une concentration d’éthanol appropriée pour éliminer le milieu de cryo-enrobage. L’étape de retrait permet d’éviter le relâchement du milieu, qui pourrait autrement affecter la visualisation des tissus pendant la coloration. De plus, l’éthanol fixe les tissus, maintenant la morphologie et l’intégrité des tissus.
Ensuite, pipetez une solution de violet de crésyle sur le tissu. Le violet de crésyle, un colorant basique chargé positivement, se lie à des fractions polyanioniques telles que les protéoglycanes dans la matrice du tissu cartilagineux. Alors que, dans les tissus minéralisés tels que les os, il réagit avec des groupes chargés négativement tels que les groupes phosphate dans la matrice osseuse.
Étant un colorant métachromatique, le violet de crésyle colore différentes régions du tissu dans des couleurs différentes du colorant naturel en fonction de son interaction avec différents constituants chimiques au sein de ces régions.
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