Coloration à l’argent des glycosaminoglycanes sulfatés : une méthode de coloration pour la visualisation des glycosaminoglycanes sulfatés dans des gels de polyacrylamide

Les glycosaminoglycanes sulfatés, GAG, sont de longs polysaccharides linéaires, chargés négativement, avec des chaînes d’unités disaccharides répétitives sulfatées à des positions distinctes, existant en longueurs variables.

Pour visualiser des GAG sulfatés isolés d’intérêt variant en longueur de chaîne dans un gel de polyacrylamide après électrophorèse, retirez soigneusement le gel de sa cassette. Rincez à l’eau déminéralisée, en enlevant les morceaux de gel attachés qui pourraient interférer avec les taches.

Traiter avec une solution acide de bleu d’Alcian. Dans des conditions acides, le bleu alcien, un colorant cationique polyvalent avec un atome de cuivre au centre, interagit spécifiquement avec les GAG sulfatés chargés négativement via des interactions ioniques, formant un complexe insoluble dans l’eau d’un bleu profond.

Lavez le gel avec de l’eau déminéralisée et du méthanol, en éliminant toute tache résiduelle. Incuber le gel avec une solution alcaline de nitrate d’argent. Dans des conditions alcalines, les GAG sulfatés liés au bleu d’Alcian fournissent des sites pour que les ions d’argent chargés positivement se lient et forment des complexes.

Traitez le gel dans une soluti