Méthode de double coloration : une technique pour visualiser les interactions plantes-champignons à l’aide de rouge de ruthénium et de bleu de coton lactophénol

Dans la rouille du café, les spores d’Hemileia vastatrix - un champignon pathogène - atterrissent à la surface de la plante et développent un tube de germination, initiant ainsi une infection via les hyphes.

Ces hyphes se propagent à l’intérieur des tissus et envahissent les cellules végétales via des structures spécialisées en forme de doigts appelées haustoria, qui absorbent les nutriments de la plante. Les haustoria sécrètent également des molécules effectrices qui sont reconnues par les protéines de résistance de la plante, ce qui conduit à une encapsulation riche en pectine de l’haustoria pour limiter l’infection.

Pour visualiser cette interaction, commencez par une section de feuille de caféier ultrafine, incrustée de résine et infectée. Maintenant, traitez l’échantillon avec du bleu de coton lactophénol - une coloration histologique comprenant du phénol, de l’acide lactique, du glycérol et du bleu de coton. Chauffez brièvement la diapositive.

Lorsque les composants du colorant pénètrent dans les tissus, le phénol élimine tous les organismes vivants, tandis que l’acide lactique et le glycérol aident à préserver l’architecture cellulaire. Simultanément, les molécules de bleu d