Encyclopédie des expériences JoVE
Techniques biologiques
0 vues • 3:59 min • July 8th, 2025
La chromatographie sur couche mince à haute performance, HPTLC, est une technique analytique avancée permettant de séparer différents analytes à l’aide de particules adsorbantes de taille fine comme phase stationnaire. Cette caractéristique facilite un emballage efficace, assurant une meilleure séparation.
Pour séparer les lipides à l’aide de la HPTLC, prenez un mélange de lipides de différentes polarités obtenus à partir de neutrophiles. Maintenant, pré-équilibrez la plaque dans un solvant organique pour éliminer toute trace de vapeurs d’eau et de saleté, puis activez-la à haute température pour éviter la détérioration de la plaque.
Appliquez le mélange de lipides et un étalon en points séparés près de la base de la plaque. Transférez la plaque dans une chambre en verre saturée d’un solvant polaire - la phase mobile. Laissez le solvant se déplacer vers le haut par capillarité.
En se déplaçant, davantage de lipides polaires migrent le long du front du solvant en raison de leur affinité envers le solvant polaire. À l’inverse, moins de lipides polaires sont adsorbés sur les particules de silice et sont en retard. Faites passer les lipides dans un solvant de polarité intermédiaire, su
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