Techniques de chromatographie

Dans cette vidéo, nous démontrons une technique de chromatographie par échange d’anions pour purifier les protéines humaines liant le calcium S100A12 basée sur la charge de surface nette de la protéine provenant d’une culture d’Escherichia coli.

Dans cette vidéo, nous démontrons la purification d’une protéine de liaison au calcium à partir d’un lysat cellulaire dialysé par chromatographie d’interaction hydrophobe dépendante du calcium. Les protéines de liaison au calcium exposent une région hydrophobe lors de la liaison avec le calcium, facilitant l’interaction avec un groupe hydrophobe sur la résine. Plus tard, ces protéines sont éluées à l’aide d’un chélateur de calcium EDTA qui inverse l’interaction.

Dans cette vidéo, nous démontrons la technique de chromatographie d’affinité au nickel pour purifier les enzymes pyrophosphokinases marquées à l’histidine des bactéries Clostridium difficile.

Cette vidéo montre la séparation des acides mycoliques par chromatographie sur couche mince. Cette technique sépare les différents acides mycoliques – des lipides à longue chaîne présents dans la paroi cellulaire des mycobactéries – en fonction de leur polarité.

Dans cette vidéo, nous démontrons la technique permettant d’isoler le baculovirus d’un surnageant de cellule d’insecte à l’aide de la chromatographie d’affinité de l’héparine. L’isolement est facilité par l’affinité entre l’héparine contenue dans la colonne et la glycoprotéine d’enveloppe du baculovirus.

Cette vidéo présente la technique de chromatographie d’échange de cations permettant d’isoler la protéine recombinante du lysat de protéine de cellule d’insecte.

Cette vidéo démontre le principe de séparation des composés polaires hydrophiles à l’aide de la chromatographie liquide à interaction hydrophile. Cette technique aide à la purification de divers analytes polaires, y compris les N-glycanes.

Dans cette vidéo, nous démontrons une technique, la chromatographie d’exclusion stérique, pour séparer une population hétérogène de vésicules membranaires externes ou OMV dérivées de bactéries. Ces vésicules sont des structures sphériques de taille nanométrique et sont séparées en grandes et petites sous-populations en fonction de leur taille par chromatographie d’exclusion stérique.

Cette vidéo démontre la caractérisation par chromatographie liquide de l’interaction hydrophobe des conjugués anticorps-médicament. À l’aide d’une colonne de chromatographie basée sur le ligand butyle, les conjugués anticorps-médicament sont caractérisés par des interactions hydrophobes avec le ligand.

Dans cette vidéo, nous démontrons la détection des acides sialique, de l’acide N-acétylneuraminique et de l’acide N-glycolylneuraminique, à l’aide de la chromatographie liquide à haute performance, HPLC, après dérivation avec un réactif de marquage fluorescent approprié pour faciliter la détection de fluorescence.

Dans cette vidéo, nous démontrons une technique de chromatographie d’exclusion stérique à détection de fluorescence pour dépister la stabilité des protéines membranaires fusionnées à la protéine fluorescente verte (GFP) chez Escherichia coli après solubilisation au détergent. Les protéines présentant un pic symétrique dans le profil d’exclusion stérique avec peu ou pas de GFP libre indiquent des protéines purifiées avec une dégradation et une agrégation minimales, qui peuvent ensuite être...

Cette vidéo décrit une technique de chromatographie d’affinité pour purifier les anticorps monoclonaux 2F5 à l’aide des ligands DsRed-2F5-Epitope ou DFE. Les anticorps monoclonaux 2F5 purifiés sont des médicaments essentiels en immunothérapie.

Cette vidéo présente un dosage enzymatique basé sur la chromatographie sur couche mince pour déterminer l’activité de la pyrophosphokinase à l’aide de nucléotides radiomarqués. La méthode fournit des informations sur la synthèse des nucléotides et les réactions de phosphotransfert.

Cette vidéo montre l’utilisation de la chromatographie en phase gazeuse dans l’espace de tête pour déterminer les concentrations d’éthanol dans les embryons de poisson-zèbre. Cette méthode constitue un outil utile pour l’analyse qualitative et quantitative des composés organiques volatils.

Cette vidéo présente une technique de séparation et de quantification préliminaires des lipides des neutrophiles dérivés du sang périphérique humain. Cette technique permet d’évaluer initialement les analytes cibles avant de procéder à la HPLC.