Électrophorèse sur gel de polyacrylamide : une technique analytique pour détecter les sulfates d’héparane de différentes longueurs de chaîne isolés dans le tissu pulmonaire de souris

Les glycosaminoglycanes sulfatés comme les sulfates d’héparane, HS, sont des polysaccharides sulfatés, linéaires et chargés négativement, de longueurs de chaîne variables, attachés aux protéines de surface cellulaire.

Pour estimer les HS de différentes longueurs isolés dans le tissu pulmonaire de souris, commencez par l’assemblage de la cassette de gel. Remplissez-le partiellement d’une solution hautement concentrée d’acrylamide-bisacrylamide, y compris des agents catalyseurs - persulfate d’ammonium et tétra-méthyl-éthylène-diamine. Recouvrir d’eau pour éviter le contact avec l’air, ce qui peut inhiber la polymérisation. Couver.

Les agents catalyseurs induisent la polymérisation de l’acrylamide-bisacrylamide, formant un gel de résolution des petits pores. Jeter l’eau. Ajouter une solution à faible concentration d’acrylamide-bisacrylamide avec des agents catalyseurs. Insérez un peigne à gel pour créer des puits. La solution polymérise, formant un gel d’empilement à gros pores.

Chargez les chambres du réservoir d’électrophorèse avec un tampon de fonctionnement pour une conductivité électrique optimale pendant l’électrophorèse.

Dissoudre le mélange HS dans un tampon de chargement cont