Focalisation isoélectrique en phase liquide : une technique d’électrophorèse pour séparer les molécules bioactives de l’extrait brut de Gymnema sylvestre

Commencez avec une cellule IEF à focalisation isoélectrique pré-assemblée - une unité d’électrophorèse en phase liquide. Cette colonne est une chambre poreuse horizontale compartimentée avec des bornes positives et négatives distinctes aux extrémités.

Maintenant, prenez l’extrait de plante contenant un mélange complexe de composants chargés différemment avec des points isoélectriques variables, pI - un pH où la charge nette sur une molécule est nulle.

L’extrait est complété par des ampholytes de charges variables qui facilitent le fractionnement ultérieur des composants de l’échantillon.

Chargez l’échantillon dans les ports de chargement de la colonne. Actuellement, la colonne IEF a un pH constant. Ensuite, appliquez une haute tension pour initier l’électrophorèse.

Sous le champ électrique, les ampholytes solubles migrent vers des électrodes de charge opposée et établissent un gradient de pH linéaire à travers la colonne. Les composants de l’échantillon commencent à migrer à travers le gradient de pH de la phase liquide, et ceux positionnés à un pH inférieur à leur pI portent une charge positive nette.

Ceux-ci migrent vers l’électrode négative jusqu’à ce que les composants atteigne