Essai de chiralité cellulaire en forme d’anneau : une technique in vitro pour déterminer la chiralité multicellulaire basée sur l’alignement cellulaire sur des micromotifs en forme d’anneau

Pour déterminer in vitro la chiralité des cellules de mammifères - le biais gauche-droite des cellules pour s’aligner dans une orientation vers la gauche ou vers la droite dans des conditions de confinement - commencez par des lames recouvertes d’or fabriquées sur mesure dans une plaque multipuits contenant un support. Les lames comprennent des micromotifs d’îlots en forme d’anneau de fibronectine favorisant l’adhésion cellulaire, remplis d’une monocouche auto-assemblée résistante à l’adhésion cellulaire.

Ensuite, ensemencez un volume approprié de suspension de cellules de mammifères sur les lames et incuberez. Les cellules s’adsorbent sur les micromotifs de l’anneau contenant la fibronectine. La monocouche auto-assemblée environnante empêche la fixation de cellules non spécifiques en dehors des limites de l’anneau.

Remplacez le support, en retirant toutes les cellules non attachées, par un support frais. Ajoutez un médicament interférant avec l’actine à un ensemble de lames et incuber.

Les cellules adhérentes prolifèrent, s’étendent et prennent la forme des îlots de fibronectine sous-jacents, tout en réorganisant leurs fibres d’actine en réponse aux signaux spatiaux, qui confinent