Dosage de la bicouche lipidique à support sphérique : une technique pour observer l’assemblage de la septine sur des microsphères

Les septines sont des protéines cytosquelettiques clés qui se lient aux surfaces incurvées de la membrane plasmique.

Pour observer in vitro l’assemblage de la septine sur des microsphères, il faut d’abord prendre une suspension de billes de silice microscopiques de taille uniforme, agissant comme un support solide pour la formation de bicouches. Vortex cette suspension pour casser les grappes de billes.

Complétez-le avec de petites vésicules unilamellaires, SUV - vésicules sphériques entourées d’une seule bicouche lipidique. Incuber avec une agitation constante, empêchant les microsphères de se déposer.

Pendant l’incubation, les groupes de tête polaire externe facilitent l’adsorption des SUV sur la surface de la microsphère hydrophile. Cette interaction provoque la rupture des SUV, suivie de la fusion des lipides SUV sur la surface incurvée de la microsphère sous la forme d’une couche continue, ce qui entraîne la formation d’une bicouche lipidique sphérique soutenue.

Laver pour éliminer l’excès de lipides non liés et remettre en suspension dans le tampon de réaction. Transférez la suspension sphérique SLB sur une petite région d’une surface recouverte de polyéthylène glycol, afin d