Dosage de l’activité des endotoxines : un essai biologique basé sur la chimiluminescence pour l’étude de l’activité des endotoxines dans un échantillon de sang

Chez les bactéries à Gram négatif, les endotoxines lipopolysaccharidiques sont des composants vitaux de la membrane externe bactérienne.

Structurellement, une endotoxine est composée de l’antigène O - la chaîne polysaccharidique la plus externe reliée par un noyau central au lipide A, un glycolipide immunostimulant crucial pour l’activité de l’endotoxine.

Pour étudier l’activité des endotoxines, prenez une éprouvette avec un tampon approprié contenant des anticorps anti-lipides A, du zymosan - un activateur exogène des neutrophiles, et du luminol - un agent chimiluminescent.

Mettre en suspension un volume optimal d’un échantillon de sang infecté composé d’endotoxines et de cellules sanguines, y compris les neutrophiles. Incuber le tube dans des conditions physiologiques.

Au cours de l’incubation, l’anticorps anti-lipide A reconnaît le composant lipide-A de l’endotoxine et se lie à celui-ci via des domaines de liaison à l’antigène, ce qui entraîne la formation d’un complexe anticorps-endotoxine.

Le domaine FC de l’anticorps lié aux endotoxines se lie au récepteur complémentaire des neutrophiles, présentant les endotoxines attachées aux neutrophiles. Cette liaison agit comme un stimu