Encyclopédie des expériences JoVE
Techniques biologiques
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L’hémolyse est la rupture des érythrocytes pour libérer leur contenu cellulaire dans l’espace environnant.
Pour doser l’hémolyse, commencez par un tube contenant des érythrocytes dans une solution isotonique sans glucose, contenant des électrolytes, par rapport aux fluides corporels. Cette solution permet de garder les érythrocytes intacts, et l’absence de glucose induit un stress cellulaire. Cela active les canaux cationiques permettant l’entrée des ions calcium dans l’espace cytosolique de la cellule.
Ajoutez une solution contenant une concentration optimale d’ions calcium-ionophores qui lie les ions calcium et facilite leur transport dans le cytosol, provoquant une surcharge d’ions calcium à l’intérieur des érythrocytes.
Cet afflux active la scramblase, une protéine qui transfère les phospholipides entre les monocouches lipidiques de la membrane plasmique, perturbant ainsi son asymétrie. Ce phénomène transfère également la phosphatidylsérine, un phospholipide de la monocouche interne, vers la monocouche externe, un indicateur de l’éryptose - mort programmée des érythrocytes.
Une augmentation des ions calcium cytosoliques active les canaux potassiques et chasse les ions potassium
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