Essai biologique sur cellules Caco-2 : une méthode in vitro pour mesurer la biodisponibilité du fer dans des sources alimentaires complexes
Encyclopédie des expériences JoVE
Techniques biologiques
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Les entérocytes sont des cellules spécialisées de l’intestin grêle qui jouent un rôle crucial dans l’absorption des nutriments, y compris l’absorption du fer.
Pour évaluer la biodisponibilité du fer - la proportion de fer ingéré accessible aux fonctions physiologiques - prélever une solution acidifiée contenant l’échantillon alimentaire. Maintenant, ajoutez de la pepsine - une enzyme de digestion des protéines, de l’estomac. À pH acide, la pepsine initie la digestion gastrique en décomposant des protéines alimentaires complexes en petits peptides.
Ajoutez du bicarbonate de sodium pour augmenter le pH et arrêter la digestion gastrique. Ajoutez une solution contenant des enzymes pancréatiques et de la bile pour simuler la digestion intestinale. Transférez le mélange dans la partie supérieure d’un système de culture cellulaire à deux chambres.
La chambre inférieure contient des entérocytes différenciés de Caco-2 - une lignée cellulaire d’adénocarcinome du côlon. Une membrane de dialyse sépare la chambre supérieure de la chambre inférieure. La membrane permet la diffusion d’espèces de faible poids moléculaire.
Le mélange d’enzymes pancréatiques et de bile dans la chambre supérieure déc
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